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预防细胞实验超净工作台内支原体污染的方法与策略!

(2025-07-04 15:08:23)
标签:

技术

方法

策略

分类: 百欧博伟生物

    预防细胞实验超净工作台内支原体污染的方法与策略!

 


百欧博伟生物:在细胞培养实验中,支原体污染是一个普遍且棘手的问题。据估计,细胞培养中的支原体污染率可高达15-35%,甚至在某些情况下达到63%。由于支原体感染难以通过肉眼检测,且对细胞生长率影响较小,因此很容易被忽视,从而影响实验结果的可靠性。本文旨在探讨如何有效预防细胞实验超净工作台内发生支原体污染。

 

1、控制环境污染

 

环境是支原体污染的主要来源之一。因此,控制环境污染是预防支原体污染的首要任务。细胞培养实验室应保持整洁,定期清洁和消毒,包括环境空气消毒、物体表面消毒、生物安全柜或超净工作台灭菌及培养箱消毒。目前,过氧化氢干雾灭菌技术被认为是替代甲醛熏蒸的有效消毒方式,其灭菌效果全面彻底,不留死角。

 

2、严格实验操作

 

实验操作不规范是导致支原体污染的重要原因。在细胞培养过程中,应执行良好的细胞培养规范,包括一次只培养一个细胞系,清晰标记并专用移液器和吸头,避免交叉污染。同时,应定期维护移液器和液体处理控制器,减少液体溢漏和飞溅,从而降低污染风险。

 

3、保证无菌环境

 

细胞培养和器材的无菌状态是预防支原体污染的关键。在细胞培养过程中,应使用无菌耗材,并在使用前进行高压灭菌处理。对于细胞培养试剂和培养基,应使用0.1μm孔径的无菌过滤器进行过滤,以有效防止支原体通过气溶胶传播。

 

4、通风与防护

 

通风是预防支原体污染的重要手段。在细胞间工作台四周的通风应保持畅通,紫外灭菌时和做实验时均应开启通风设备。75%的循环风可以有效阻止支原体进入工作区域。此外,使用支原体专用杀除剂的湿巾对工作台、超净台、培养箱等细胞培养环境进行定期消毒,也是有效预防支原体污染的措施。

 

5、支原体检测与清除

 

定期检测所有细胞系的支原体污染情况,尤其是新细胞系,是预防支原体污染的必要措施。将新细胞系隔离在单独的培养箱中,直到明确证明其未受支原体污染。若细胞发生支原体污染,应使用有效的支原体清除试剂进行清除。基于截短侧耳素类衍生物和四环素衍生物的抗生素溶液联合使用,可以取得良好的效果。

 

6、结论

 

预防细胞实验超净工作台内发生支原体污染是一个综合性的任务,需要控制环境污染、严格实验操作、保证无菌环境、加强通风与防护以及定期检测与清除支原体。通过执行这些措施,可以显著降低细胞培养实验室的支原体污染及传播风险,确保实验结果的准确性和可靠性。

 

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