小鼠骨髓瘤细胞的核心应用与培养指南及相关研究！

小鼠骨髓瘤细胞是生物医学研究中常用的一类细胞系，尤其在单克隆抗体生产（如杂交瘤技术）中发挥关键作用。以下是关于小鼠骨髓瘤细胞的详细介绍：

1、背景与特点

来源：小鼠骨髓瘤细胞源自小鼠B淋巴细胞系的恶性肿瘤（浆细胞瘤），具有无限增殖能力。

缺陷特性：大多数骨髓瘤细胞系（如SP2/0、NS0）经过诱变处理，缺乏HGPRT酶（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶），无法通过“补救途径”合成DNA，因此在HAT培养基中会死亡。这一特性被用于筛选杂交瘤细胞。

2、常用的小鼠骨髓瘤细胞系

SP2/0-Ag14：最常用，源自BALB/c小鼠，HGPRT缺陷，与脾细胞融合后用于生产单克隆抗体。

NS0/1：同样缺乏HGPRT酶，但部分细胞系需添加胆固醇或脂类辅助生长。

P3X63Ag8.653：早期常用，现逐渐被SP2/0取代。

3、核心应用：杂交瘤技术

原理：将小鼠骨髓瘤细胞（无限增殖能力）与免疫后的小鼠脾细胞（分泌特定抗体）融合，形成杂交瘤细胞，既能无限增殖，又能分泌单一抗体。

筛选过程：

使用HAT培养基（含次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶），骨髓瘤细胞因缺乏HGPRT酶死亡，未融合的脾细胞无法长期存活，只有杂交瘤细胞存活。

通过有限稀释法筛选单克隆杂交瘤细胞株。

4、科研与工业应用

单克隆抗体生产：用于诊断试剂、治疗性抗体（如抗癌药物）开发。

免疫学研究：研究B细胞分化、抗体分泌机制。

癌症模型：探究骨髓瘤发生机制及药物筛选。

5、培养条件

培养基：常用RPMI 1640，添加10-20%胎牛血清（FBS）。

环境：37、5% CO，悬浮或半贴壁生长。

注意事项：定期检测支原体污染，避免细胞过度密集。

6、注意事项

伦理规范：涉及动物细胞的研究需符合实验室动物伦理要求。

稳定性：长期传代可能导致细胞特性改变，需定期冻存原始细胞。

若有具体问题（如实验设计、细胞培养细节），可进一步探讨！

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