支原体、衣原体培养方法对比及临床检测建议与采集注意事项!
(2025-06-13 15:35:08)
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支原体、衣原体培养方法对比及临床检测建议与采集注意事项!
支原体和衣原体是两类常见的非典型病原体,可引起呼吸道、泌尿生殖道等感染。它们的培养方法与普通细菌不同,且临床检测中常结合分子生物学方法(如PCR)以提高敏感性。以下是关于两者细菌培养的详细说明:
一、支原体(Mycoplasma)培养
1、生物学特性
无细胞壁,形态多变,对培养基要求高。
生长缓慢(需数天至数周),需富含胆固醇和脂肪酸的培养基。
2、培养方法
常用培养基:SP4液体或固体培养基、PPLO培养基(添加马血清、酵母提取物等)。
培养条件:37、5% CO环境,需持续观察2-3周。
鉴定:通过培养基颜色变化(如酚红指示剂)、菌落形态(“荷包蛋样”菌落),或PCR确认。
3、临床常见检测
泌尿生殖道支原体(如解脲脲原体、人型支原体):取尿道拭子、宫颈拭子或尿液培养。
呼吸道支原体(如肺炎支原体):痰液或咽拭子培养(但临床更多依赖血清学或PCR)。
二、衣原体(Chlamydia)培养
1、生物学特性
专性细胞内寄生,无法在无细胞培养基中生长。
生活周期包括原体(感染相)和网状体(复制相)。
2、培养方法
细胞培养法:使用McCoy细胞、HeLa细胞等,离心促进衣原体进入细胞。
步骤:
样本(如宫颈拭子、尿道拭子)处理后接种于细胞单层。
37孵育48-72小时,后固定染色(吉姆萨染色或荧光抗体染色)观察包涵体。
鉴定:显微镜下见细胞内包涵体为金标准,但操作复杂且敏感性较低。
三、培养的局限性
1、支原体培养:
敏感性低(尤其肺炎支原体),易受样本运输、保存条件影响。
临床更多依赖分子检测(如PCR)或血清学(IgM抗体)。
2、衣原体培养:
耗时长(3-7天),需专业细胞培养技术,逐渐被核酸扩增技术(NAAT)取代。
仅用于特定研究或耐药性分析。
四、临床检测建议
1、优先选择分子检测(如PCR、RNA探针):
快速(数小时)、敏感性高(>90%),适合筛查衣原体/支原体感染。
2、培养的适用场景:
抗生素耐药性研究。
特殊病例(如治疗失败需活菌药敏试验)。
五、样本采集注意事项
1、支原体:无菌拭子采集后立即送检,或置于专用运输培养基(如STM)。
2、衣原体:需保持细胞活性,冷藏(2-8)并尽快接种至细胞培养体系。
六、治疗提示
1、支原体:对大环内酯类(阿奇霉素)、四环素类(多西环素)敏感。
2、衣原体:首选阿奇霉素或多西环素,注意性伴侣同治。
若有疑似感染症状(如非淋菌性尿道炎、肺炎),建议及时就医并选择敏感度高的检测方法,避免延误治疗。
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