人胶质瘤细胞的处理方法与培养步骤及注意事项！

一、细胞简介

平台编号：Bio-73178

规格：1×10Cells/T25培养瓶

细胞信息：U251

细胞名称：U251（人胶质瘤细胞）

种属：人

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

背景描述：U251细胞源自一位患者的胶质母细胞瘤组织。

生长培养基：DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37

用途：(STR鉴定正确)

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、细胞的运输和保存

采用干冰保存运输

收到细胞时，若干冰已经完全融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

三、细胞用途

本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗等其他方面。

四、细胞处理方法

（一）贴壁细胞

1、接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。

2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。

3、严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。

4、37度平衡1-2小时。

5、用移液管吸取培养基，到50ml离心管中，剩下细胞密度达到80%至90%可以传代，如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。

6、如果肉眼检查上清有细胞，对50ml上清进行离心收集细胞，如果细胞连片状态，弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化（1ml胰酶37度），接种培养。

（二）悬浮细胞

1、接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。

2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。

3、严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。

4、细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。

5、1000rpm，5min 离心，用吸管小心吸出上清，加入培养基，重悬细胞。

6、将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种，加入新鲜培养基，置于 37，5%CO2 培养（大部分细胞）。

五、注意事项

1、收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3、用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。