ATCC 19414 猪丹毒丝菌的培养方法与注意事项！

猪丹毒杆菌属丹毒杆菌属，是一种革兰氏阳性菌，具有明显的形成长丝的倾向，为平直或微弯杆菌，大小为（0.2-0.4）微米×（0.8-2.5）微米。该菌在病猪体内与培养基内形态有所变化，在病料内的细菌单在、成对或成丛排列；在白细胞内通常成丛存在；在陈旧的肉汤培养物及慢性病猪的心内膜疣状物中，多呈长丝状。病菌无运动性，不形成芽孢和荚膜。

一、菌种简介

平台编号：Bio-67883

规格：冻干物

拉丁属名：Erysipelothrix Rhusiopathiae

菌株名称：猪丹毒丝菌

其他编号：ATCC 19414=NCTC 8163

培养基编号：35

培养温度：37,5% CO2

培养时间：48 小时

用途：质量控制菌株

分离源：猪脾脏

培养基信息

培养基编号：35

名称：Blond Agar (血琼脂培养基)

备注：Peptone (蛋白胨) 10g Glucose (葡萄糖) 2g NaCl 5g NaH2PO4 2.5gSodium citrate (柠檬酸钠) 5g Brain infusion (脑浸汁) 800mlPig heart infusion (猪心浸) 200ml Sleep Blood (羊血) 10%pH 7.2 [Note]：Preparation of pig brain and pig heart infusion：（1） Smash up 100g fresh pig heart （without fat and blood vessel）.Add distilled water up to 1000ml;（2） Cut 200g fresh pig brain (without blood vessel). Add distilled water up to 1000ml;（3） Keep the two infusions at 50 for 1 hr , then boil for 15 minutes;（4） Cool and filtrate through gauze . [注]猪心和猪脑浸汁法：（1）新鲜猪心除去心头和脂肪，搅碎100克加蒸馏水至1000毫升；（2）新鲜猪脑除去血管，取200克加蒸馏水至1000毫升；（3）50保温1小时，然后煮开15分钟；（4）冷却后用纱布过滤备用。

用途：质量控制菌株

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

TSA+5%脱纤维蛋白羊血（血琼脂平板）

三、保藏条件

培养物和安瓿冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请放-20°C 保存。甘油请置于-80°C。

四、注意事项

1）冻干粉首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板）；

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到后 2 个月内联系，逾期不予受理；

8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

10）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。