地中海富盐菌的培养与保存及冻干管打管说明！

地中海富盐菌是中国农业科学网收藏的一种模式菌株。主要用于教学，研究。

一、菌种简介

平台编号：Bio-08580

规格：冻干物

拉丁属名：Haloferax Mediterranei

中文译名：地中海富盐菌

拉丁学名：Haloferax mediterranei

原始编号：JCM 8866

菌株来源：←JCM

保藏人：周宇光

直接来源国家：日本

保藏时间：9/20/2004

其他保藏编号：=ATCC 33500 =CCM 3361 =DSM 1411 =NBRC 14739

生物危害：四类

模式菌株：模式菌株

菌株用途：模式菌株

培养温度：37

培养基：0212   

分离源：阿里坎特附近的盐池塘

采集国家：西班牙

提供形式：冻干物

用途：模式菌株

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、菌种保存条件

斜面、穿刺菌和冻干粉应在 4-10 度保存，甘油菌在-80 度保存。

三、菌种培养条件

培养基：CM琼脂

培养基成分：酪蛋白氨基酸 7.5g 酵母提取物10.0g柠檬酸钠3.0gMgSO4·7H2O20.0gKCl2.0gFe++10.0ppmNaCl200.0g琼脂15.0g蒸馏水1.0LpH7.2

培养温度：37

需氧类型：详见说明书

四、菌种培养注意事项

1、微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

2、菌种操作在无菌条件下进行，接种完毕应该灭菌再做丢弃处理；

3、斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为 3-6 个月，应根据菌种状况及时结转；冻干粉保存时间通常是 2-25 年；甘油菌保存时间为 2-5 年;

4、冻干首-次活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.2-0.5m1的培养液或者无菌水溶解,接种在1-2个平板上,因冻干菌种处于休眠状态,请勿接种多个平板,以免因接种量不足而导致复苏不成功。

5、如果有不明白之处，应先与我中心联系，避免不必要的损失。

五、冻干管打管说明书

1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂（应避免过多水蒸气影响菌种的复苏），用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、用无菌吸管吸取 0.3ml（建议勿超过 0.5ml）适宜的液体培养基(不添加琼脂)，滴入管内，轻轻振荡，待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状，将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，可将残留在吸管中的 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养，以液体培养结果为准。

3、冻干管打开后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。

4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

6、菌种复苏时，请务必记录好菌种的编号和制备批号，如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理。