普通高温放线菌的培养方法与注意事项有哪些？

普通高温放线菌，基丝长而有分枝，直径0．5微米，一般无色。气丝粉状，白色至乳脂色。孢子单个，圆形至多角形，表面光滑，无柄或在短柄顶端。主要用于白酒酿造，产酯酶。

一、菌种简介

平台编号：Bio-84704

规格：冻干粉

拉丁属名：Thermoactinomyces Vulgaris

中文名称：普通高温放线菌

拉丁名称：Thermoactinomyces vulgaris

来源历史：←山东扳倒井股份有限公司

收藏时间：2017/7/11

原始编号：H-1

原产国：中国

资源归类编码：15131500000

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；生产

特征特性：NA培养基，55培养48h，菌落淡黄色至白色，近圆形边缘较整齐，稀疏放射状褶皱，且有环纹，表面颗粒状干燥，薄，不透明。基丝长而有分枝，直径0.5μm，无色；气丝粉状，白色至乳脂色；菌丝长，有1-2μm长的短枝，孢子单个，圆形，表面光滑。

具体用途：白酒酿造。产酯酶。

生物危害程度：四类

培养基编号：CM0002

培养基名称：营养肉汁琼脂

培养基成分：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。

培养温度：55

需氧类型：好氧

分离基物：中高温大曲

采集地：山东省淄博市高青县

保存方法：-80冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：白酒酿造。产酯酶。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、菌株性质

菌丝长，有1—2微米长的短枝。细胞壁组份型（以内消旋二氨基庚二酸为特征性成分），糖模式C型（无特征性糖）。蔗糖硝酸盐琼脂：气丝白色。基丝无色。葡萄糖天冬素琼脂、燕麦粉琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂：生长中等至贫乏。营养琼脂、麦芽精酵母精琼脂：生长快，极好。气丝白色至淡黄色。基丝黄褐色。无可溶色素。明胶液化。牛奶凝固并胨化。淀粉水解。硝酸盐不还原。生长适温57或60；生孢子适温55；37生长；27 和70不生长。

三、培养基

营养琼脂培养基(NA)

四、保藏条件

安瓿瓶冻干菌种和培养物应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20冷冻。甘油保藏温度为-80°C;请勿长期置于室温。

五、注意事项

1）冻干粉首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板或者斜面，若接种液体培养基，则试管液体不超过 5ml 为宜）；

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或不活，请在收到后 2 个月内和微生物菌种查询网联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。