内氏放线菌的培养条件与传代方法及注意事项！

内氏放线菌形态微白坚实的菌落：微菌落颗粒状，密致，带放射状有分枝的菌丝，偶见整齐颗粒状半球形菌落；大菌落直径达2毫米，光滑白色，凸面至脐状菌落最常见，表面不规则的凹陷菌落较少。细胞为阳性或阴性杆菌，直径和长度不一。

一、菌种简介

平台编号：Bio-134610

规格：冻干物

拉丁属名：Actinomyces Naeslundii

菌株名称：内氏放线菌

培养基特殊蛋白胨：23.0，可溶性淀粉：1.0，氯化钠：5.0，琼脂：10.0，pH：7.3±0.2（25）

生长条件：37；24-48h；5%CO2

存储条件：2-8

安全等级：2

形态菌落：直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面白色，反面白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，质地黏稠，G＋（蓝紫色），纯度：纯，杆菌

模式菌株：no

来源编号：ATCC 19039

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

哥伦比亚血平板（建议购买市面上成品培养基）

三、传代方法

准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

四、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请放-20°C 保存。甘油请置于-80°C。

五、注意事项

1）准备 1 支含有 5-10ml 的液体培养基的试管和 2 个平板；生物安全柜打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子使其敲碎；吸取 0.5ml 液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；吸取 0.2ml 菌悬液打入平板中，涂布均匀重复获得两个平板；将液体试管和平板全部置于要求的培养条件下培养。

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌种后 2 个月内联系，逾期不予受理；

8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

10）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。