瑞士乳杆菌的培养方法与注意事项及打管说明！

瑞士乳杆菌是革兰氏阳性细菌中的一种，为益生菌，其呈长杆状，无鞭毛，无芽孢，菌落圆形，乳白色，边缘整齐，化能异养性，兼性厌氧，不液化明胶。主要用于制造食品酸乳饮料、乳酒、饲料添加剂等。

一、菌种简介

平台编号：Bio-67754

规格：冻干物

拉丁属名：Lactobacillus Helveticus

菌株名称：瑞士乳杆菌

培养基编号：44

培养温度：37

用途：用于生产酸奶

培养基编号：44

名称：Skim Milk Medium (脱脂牛奶培养基) ATCC 183

可用于培养菌种：适用范围：保加利亚乳杆菌、嗜热乳酸链球菌

备注：脱脂牛奶 100g 去离子水 1000ml

用途：用于生产酸奶

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

MRS 培养基

酪蛋白胨 10 克 牛肉浸取物 10 克

酵母提取液 5.0 克 葡萄糖 20 克

乙酸钠 5.0 克 柠檬酸二胺 2.0 克

吐温 80 1.0 克 磷酸氢二钾 2.0 克

七水硫酸镁 0.2 克 七水硫酸锰 0.05 克

碳酸钙 20.0 克 琼脂 20.0 克

蒸馏水 1.0 升 PH 6.8

如果要配制液体培养基，则不用加入碳酸钙和琼脂

三、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请在-20°C 保存。

四、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板）； 经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

6）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到后 2 个月内联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

五、打管说明书

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4中保藏。