粪产碱杆菌的培养条件与注意事项及打管说明！

粪产碱杆菌，外型为杆、短杆或球状，直径为0.5~1.0mm，长度为0.5~2.6mm，通常为单一菌体排列，不产生孢子，可以借着1~8条（有时可以高达12条）周鞭毛移动。具有较高的L-羧乙基海因酶的活性，可以水解L-羧乙基海因生成L-N-氨甲酰谷氨酸。

一、菌种简介

平台编号：Bio-56945

规格：冻干物

拉丁属名：Alcaligenes Faecalis

中文名称：粪产碱杆菌

属名：Alcaligenes

种名加词：faecalis

来源历史：←南京工业大学

收藏时间：2013.4.15

原始编号：CW221

资源归类编码：15131112101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究

具体用途：具有较高的L-羧乙基海因酶的活性，可以水解L-羧乙基海因生成L-N-氨甲酰谷氨酸。

特征特性：细胞主要呈椭圆形，短杆状，长宽比约在2~3左右，也有近似球形的细胞，细胞排列无规则，为单独存在，无成串或成群细胞存在。革兰氏阴性菌，在固体培养基平板上24h生长菌落呈圆形，直径约1mm，表面光滑、乳白色、不透明，边缘不整齐，中间略有突起。其16srDNA在GenBank中的登录号为GQ222232.1。    

生物危害程度：四类

致病对象：无

分离基物：花园土壤

培养基：蛋白胨 10.0g，酵母粉 5.0g，NaCl 10.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。

培养温度：37

资源保藏类型：培养物

保存方法：-80冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：研究；具有较高的L-羧乙基海因酶的活性，可以水解L-羧乙基海因生成L-N-氨甲酰谷氨酸。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8冷藏。西林瓶菌种请置于-20冷冻。甘油请置于-80。

三、培养条件

1、培养基编号：CM0033 LB 培养基(LB Medium)

2、培养基成分：蛋白胨 10.0g，酵母粉 5.0g，NaCl 10.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。推荐使用商品化成品培养基。

3、需氧类型：好氧

4、培养温度：37

四、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、菌种恢复培养前，建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，如在说明建议的培养时间还未长起来，请继续在相应环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成，有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。

3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、恢复培养厌氧菌时，在操作过程中应严格控制厌氧条件：制作培养基时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气，使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站。

五、冻干管打管说明书

1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3 滴）无菌水至加热顶端使之破裂（应避免过多水蒸气影响菌种的复苏），用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、用无菌吸管吸取 0.3ml（建议勿超过 0.5ml）适宜的液体培养基(不添加琼脂)，滴入管内，轻轻振荡，待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状，将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，可将残留在吸管中的 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养，以液体培养结果为准。

3、冻干管打开后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。

4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

6、菌种复苏时，请务必记录好菌种的编号和制备批号，如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理。