耐盐深海球菌的形态特征与培养方法及实验内容！

耐盐深海球菌是Thalassococcus属的微生物，原产地为中国。主要用途为研究，具体用途为极端微生物/寡营养菌。

一、菌种简介

平台编号：Bio-00194

提供形式：冻干物

拉丁属名：Thalassococcus Halodurans

中文译名：耐盐深海球菌

拉丁学名：Thalassococcus halodurans

原始编号：ZJ1212

菌株来源：←国家海洋局第二海洋研究所

保藏人：许学伟

直接来源国家：中国

保藏时间：9/17/2008

生物危害：四类

模式菌株：非模式菌株

培养温度：28

培养基：0223    

其他培养条件

分离源：海水

采集地点：东海

采集国家：中国

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、形态特征

与模式菌株Thalassococcus halodurans UST050418-052(T) DQ397336相似性为100%（770/770）；2E液体培养基稀释5000倍灭完菌后加入稀释300倍的N、P，摇瓶外包金属纸，室温放置5个月后用稀释的2E或M2涂平板。

三、菌种特性

细胞圆球状,在直角两个平面交替分裂形成四联状,一般细胞成对生,单生者罕见,不成链状排列。革兰氏阳性,不运动,兼性厌氧。在MRS培养基上菌落小,呈白色。沿洋菜穿刺线的生长物呈丝状。接触酶阴性,不产细胞色素。

四、菌种的培养

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。

6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

五、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

六、使用方法

直接加入配合饲料中或先按一定倍数稀释后,再加入饲料中混匀。也可预先活化后再发酵饲料或直接供动物饮用。具体用量参考产品使用说明。

七、注意事项

产品仅用于科研实验储存时,提高水分含量则菌群活力。高温制粒时,必须对产品进行包被处理。不饱和脂肪酸对乳酸片球菌具有颉颃作用,配合日粮中添加乳酸片球菌,应尽量避免与添加的油脂直接接触。