伊红美蓝琼脂培养基（Levine）的使用与实验方法！

一、菌株简介

平台编号：Bio-55138

规格：250g

菌株名称：伊红美蓝琼脂培养基（Levine）

规格：250g

用途：弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、使用方法

称取本品18g,加入 1000ml 蒸馏水中,加热搅拌溶解,121高压灭菌 15 分钟,备用。

1、液体培养基：把培养基配好,液体一般5mL就装试管,50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中,高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于,三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌,瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了,自己现做什么的也怪麻烦的。

2、营养肉汤(NB)颗粒固体培养基：在液体培养基中添加一定浓度的琼脂,一般是100m

三、按成分可为三大培养基分类

1)合成培养基：

伊红美蓝琼脂培养基(Levine)各种成分完全是已知遥各种化学物质组成成分精确重复性强。

2)天然培养基：

由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定但配制方便营养丰富培养效果好常常被采用。

3)半合成培养基：

在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类或在合成培育基的基础上添加某些天然成分更能有次的满足微生物对营养的需要。

四、实验方法

1、培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中,每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中,用于计数,每种细菌做两个平板。

2、培养基阴性组：即空白对照,即不添加菌液。

3、接种量计数：步骤1中的平皿中,细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基,霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。

4、培养条件：

（1）无菌检查:20~25培养14天或直至出现浑浊(不超过14天)

（2）MPN计数:30~35培养箱中培养3天

（3）控制菌检查:30~35培养箱中培养18~24小时

（4）倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30~35培养箱中培养3天

（5）倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20~25培养箱中培养3~5天