基因转染增强剂的特点及使用方法与效果!
(2023-08-16 14:34:23)
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基因转染增强剂概述
基因转染增强剂(聚凝胺)又名溴化己二甲铵、海美溴铵,其是一种多聚阳离子聚合物,常用于哺乳动物细胞的 DNA 转染实验以增强转染效率。其增强转染效率原理图如下:
基因转染增强剂特点
1、基因转染增强剂广泛应用于脂质体转染、逆转录病毒介导的基因转染及慢病毒介导的基因转染等实验,可以显著提高各种逆转录病毒、慢病毒及脂质体的转染效率。如:腺病毒转染BHK-21细胞,转染率可从2.3%提高到95%。
2、基因转染增强剂对某些细胞(如末端分化的神经元,DC 细胞)毒性较大,初次应用建议先做毒性测试。
3、基因转染增强剂还是一种有效的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞;还可用于蛋白测序,小剂量的基因转染增强剂在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象;PVDF 膜上加入基因转染增强剂能提高膜的亲和性。
基因转染增强剂使用及效果
慢病毒转染实验举例:37过夜培养的细胞,吸去细胞原有培养基,将按照MOI稀释好的病毒液+培养基+基因转染增强剂(对于293细胞,终浓度6μg/mL)加入细胞中,轻轻摇匀。48小时后,吸除含慢病毒的培养基,换为新鲜的培养基。继续培养24~48小时后,根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。
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