粘着剑菌——用于植物冠瘿病害和遗传转化材料

粘着剑菌是Ensifer属的微生物，原产地为中国。主要用途为分类；研究；教学，具体用途为分类；研究；教学。

一、菌种简介

平台编号：Bio-32951

规格：培养物

拉丁属名：Ensifer Adhaerens

中文名称：粘着剑菌

拉丁属名：Ensifer

种名加词：adhaerens Casida

收藏时间*：2004-11-1

原产国：中国

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；教学

具体用途：植物冠瘿病害，遗传转化材料

生物危害程度：四类

致病对象：植物

分离基物：玫瑰根癌

采集地区：内蒙古

培养基信息：培养基编号: 33 培养基名称: LB培养基

培养温度：28

资源保护类型：培养物

保藏方法：定期移植法

共享方式：资源交换性共享

提供形式：斜面培养物

实物状态：有实物

用途：植物冠瘿病害，遗传转化材料

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、形态特征

粘着剑菌属于非模式菌株。菌落形态为圆形，颜色为白色，菌落直径较大，表面光滑，凸透镜状，透明，边缘完整，菌落中间有一白圈，过氧化氢酶阴性，吲哚反应阴性，M.R.反应阴性，V.P.反应阴性，无明胶液化能力。

三、主要价值

粘着剑菌，主要用途为分类；研究；教学，具体用途为分类；研究；教学。

四、菌种培养方法

1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。

2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。

上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,可参照以下步骤:

a、制备平板培养基将氯化钠蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65,向氯化钠蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。

b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。

c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。

五、培养及打管说明

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长。

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4中保藏。