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短刺小克银汉霉的培养条件与保存方法及打管说明!

(2023-07-26 09:45:18)
标签:

技术

方法

教育

分类: 微生物菌种

         短刺小克银汉霉的培养条件保存方法及打管说明!

 

 

短刺小克银汉霉,属霜霉目,白锈科,菌落呈棉絮状,初白色,后略带浅黄色,老后结片下陷,菌丝频繁分枝,常可形成假根。主要用于教学,研究。

 

一、菌种简介

平台编号:Bio-65534

规格:冻干粉

拉丁属名:Cunninghamella Blakeleana

中文名称:短刺小克银汉霉

属名:Cunninghamella

种名加词:blakeleana

其它中心编号:=AS 3.970

来源历史:←上海市工业微生物研究所(M170) ←中国科学院微生物研究所

收藏时间:2005.11.25

资源归类编码:15151316101

模式菌株:非模式菌株

主要用途:研究

特征特性:菌落呈棉絮状,初白色,后略带浅黄色,老后结片下陷,菌丝频繁分枝,常可形成假根。分生孢子梗轮状分枝或单轴分枝,顶端膨大成一泡囊;泡囊近球形至广棒形,表面光滑;分生孢子拟卵形至椭圆形,无色,表面光滑。    

生物危害程度:四类

致病对象:无

培养基:马铃薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,琼脂 15.0g,pH自然。[注] 马铃薯提取液:取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1.0L煮沸30min,滤去马铃薯块,将滤液补足至1.0L。

培养温度:28

资源保藏类型:培养物

保存方法:真空冷冻干燥法

实物状态:有实物

共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享

提供形式:冻干物

用途:研究;

注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

 

二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8冷藏。西林瓶菌种请置于-20冷冻。

 

三、培养条件

1、培养基编号:CM0014

2、培养基成分:马铃薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,琼脂 15.0g,pH 自然。[注] 马铃薯提取液:取去皮马铃薯 200g,切成小块,加水 1.0L 煮沸 30min,滤去马铃薯块,将滤液补足至 1.0L。

3、需氧类型:好氧

4、培养温度:28

 

四、注意事项

1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。

2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。

3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系菌种。

 

五、保存方法

1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。

2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

3、悬液保存法:

蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

4、载体保存法:土壤保存法;砂土保存法;硅胶保存法;磁珠保存法;麸皮保存法;纸片(滤纸)保存法。

5、常用的冷冻保存法:

低温冰箱保存法(-20、-50或-85):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。

干冰保存法(-70左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。

液氮保存法(-196):是适用范围最广的微生物保存法。

 

六、打管说明书

1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒,将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热;立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位,使管壁破裂;再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。

2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀,可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。

3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 2-8的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,需要转接至 2-3 代恢复活力。

4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。

5、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏(特殊除外)。

6、冻干管打开后需一次用完,不能留存。

7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

9、如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理。

 

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