细胞生物学功能鉴定服务的介绍!百欧博伟生物
(2023-03-07 10:11:36)
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一、背景及概述
细胞生物学功能鉴定服务主要包括细胞的形态特征、细胞增长情况、细胞增殖能力、细胞凋亡情况、细胞迁移、细胞毒性测试、染色等项目。其中细胞生物学功能鉴定服务中细胞迁移项目是指检测细胞在接收到内源或外源迁移信号后而产生的移动。细胞迁移是通过胞体形变进行的缓慢的定向移动,涉及细胞觅食、伤口痊愈、胚胎发生、免疫反应、感染和癌症转移等生理现象。细胞生物学功能鉴定服务中举例如下:细胞毒性试验的方式,为将大肠癌细胞株放置于一96孔培养盘(10,000cells/well)内200μL的完全培养基中,1天后,再将培养基置换成含所测试物质0.25-1.0mg/mL的完全培养基,并加入到96孔培养盘的不同孔中。另外,对照组则只加入200μL的完全培养基,培养2天之后,以四甲基偶氮唑比色法分析测定每孔中的活细胞数量比值,并以免疫酵素分析仪在570nm下测定吸光值(opticaldensity)。
细胞生物学功能鉴定服务中细胞形态变化分析的方式举例如下:为将大肠癌细胞株放置于一培养盘(皮氏培养皿(petridish)),1天后待细胞贴底,给予适量含有所测试物质(1.0mg/mL)的药物浓度,置于培养盘中预定时间(2、7、14、21或28天)后,以倒立显微镜观察细胞形态,并拍照记录。细胞生物学功能鉴定服务中细胞周期与细胞凋亡检测的方式举例如下:为将大肠癌细胞株经所测试物质(1.0mg/mL)处理后,以胰蛋白-乙二胺四乙酸(trypsin-EDTA)处理细胞,与培养液一起收集,离心后去掉上清液,并以磷酸盐缓冲溶液清洗后,加入1mL冰冷的70%酒精,放入4冰箱过夜,以固定细胞。离心后,续以1mL磷酸盐缓冲溶液悬浮,加入50mg/mL的碘化丙锭(propidiumiodide)避光作用10分钟,以532nm波长激发后,在590±40nm波长侦测细胞荧光含量,以流式细胞仪进行分析。细胞生物学功能鉴定服务中细胞爬行转移分析的方式举例如下:
为将大肠癌细胞株放置于一6孔培养盘(cultureplate)(800,000cells/well)内,培养于2mL的完全培养基,隔夜,先用200μL滴管尖头(pippetttip)画出一条直线,再将培养基置换成含所测试物质(0.25-1.0mg/mL)的完全培养基加到培养盘的不同孔中,并在100倍显微镜下拍照记录Day0的直线宽度。另外,对照组则只置换成2mL的完全培养基、无其他添加物,将该培养盘静置24小时,并拍照记录Day1直线宽度密合的程度,最后以一量测软件(ImageJ软件)测量每张图上任意5点的宽度变化,每个条件可得至少25个测量数据,相比Day0与Day1的平均数据,即可计算出细胞爬行比率。
二、基本信息
细胞生物学是以细胞为研究对象,从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次,以动态的观点, 研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律的学科。细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一,主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。从生命结构层次看,细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间,同它们相互衔接,互相渗透。运用近代物理学和化学的技术成就和分子生物学的方法、概念,在细胞水平上研究生命活动的科学,其核心问题是遗传与发育的问题。
三、学科交叉
细胞生物学广泛地利用相邻学科的成就,在技术方法上是博采众长,凡是能够解决问题的都会被使用。例如用分子生物学的方法研究基因的结构,用生物化学、分子生物学的方法研究染色体上的各种非组蛋白和它们对基因活动的调节和控制或者利用免疫学的方法研究细胞骨架的各种蛋白(微管蛋白、微丝蛋白、各种中等纤维蛋白)在细胞中的分布以及在生命活动中的变化。起源于分子遗传学的重组DNA技术和起源于免疫学的产生单克隆抗体的杂交瘤技术,也成了细胞生物学的有力工具。显然,一种方法所解决的问题不一定属于原来建立这一方法的学科。例如用分子生物学的方法解决了核小体的结构,严格地说这应是形态学的范畴。这样的例子并不少见,在这里学科的界限也被抹掉了。也许可以说细胞核移植、微量注射和细胞融合是细胞生物学自身发展起来的方法,但是用这些方法进行的实验往往也需要其他方法配合来做进一步分析。
细胞生物学与其说是一个学科,倒不如说它是一个领域。这可以从两个方面来理解:一是它的核心问题的性质──把发育与遗传在细胞水平结合起来,这就不局限于一个学科的范围。二是它和许多学科都有交叉,甚至界限难分。例如,就研究材料而言,单细胞的原生动物既是最简单的动物,也是最复杂的细胞,因为它们集许多功能于一身;尤其是其中的纤毛虫,不仅对于研究某些问题,例如纤毛和鞭毛的运动,特别有利,关于发育和遗传的研究也积累了大量有价值的资料。但是这类研究也可以列入原生动物学的范畴。其次,就研究的问题而言,免疫性是细胞的重要功能之一,细胞免疫应属细胞生物学的范畴,但这也是免疫学的基本问题。
四、细胞社会学
细胞生物学的研究往往乐于使用培养的细胞,它的优点是可以提供足够量的细胞做生化分析,并且只有一种细胞,材料比较单一,分析结果方便。但是对于某些方面的研究则有不足之处,因为细胞在任何一个有机体里都是处于一个社会之中,和别的细胞不同程度地混杂在一起,在其生命活动中不可能不受到相邻的其他细胞的影响,甚至是相邻的同类细胞的影响,其处境要比培养的细胞复杂得多。因此有些问题或者很难用培养的细胞进行,或者所得的结果只能部分地反映实际的情况,为了研究在一个细胞群中细胞与细胞间的相互关系,细胞社会学被提了出来。
细胞社会学的内容相当广泛,包括不同细胞或相同细胞的相互识别,细胞的聚集与粘连、细胞间的交通和信息交流,细胞与细胞外间质的相互影响,甚至还可包括细胞群中组织分化模式的形成。有些方面已经积累了一些资料,从细胞社会学的角度有目的地深入下去一定会提供更系统的,有用的信息。由于细胞社会学是以细胞群体为对象,而且有些问题也是发育生物学需要了解的,发展下去很可能它会成为细胞生物学与发育生物学之间的桥梁。
展望细胞生物学的研究,除去上面的工作──关于各细胞组分的结构与功能,以及对各种生命现象的了解──还要继续深入外,是什么原因使得基因能够有序地选择性地表达,可能会成为今后重点研究的问题;此外,细胞社会学也会越来越受到重视。
五、生物经济
20世纪50年代人们还搞不清楚自己的染色体是多少条,但到了2000年“人类基因组计划”工作草图完成,标志着以研究基因功能为主的后基因组时代到来。随后蛋白质组学(proteomics),RNA组学(RNomics),糖组学(glycomics)、代谢组学(metabolomics)等各种“组学”研究相继登场,以及计算生物学、纳米生物学的发展,进入了系统生物学的迅速发展时期,可以预见在不远的将来,生物科学会将人类社会带入一个新的发展阶段。
人类经历了漫长的采猎文明后,约在一万年前进入农业经济时代,18世纪60年代,英国率先进入工业经济,20世纪50美国最早走完工业经济的历程,进入信息时代。据专家估计这一经济形态的“寿命”为75~80年,到本世纪20年代将渐渐失去活力,届时人类迎接下一个经济时代,即生物经济时代的到来,生物经济的资源为基因,其核心技术为建立在细胞与分子生物学理论基础上的各类生物技术。
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