小鼠肠道干细胞的使用方法与注意事项！

一、产品简介

1、平台编号：Bio-74049

2、细胞信息：原代细胞

3、产品名称：小鼠肠道干细胞

4、组织来源：小鼠肠粘膜

5、产品规格：25cm2培养瓶

6、细胞简介：肠道干细胞是消化道中具有显著增殖及多向分化能力的一群干细胞，参与正常胃肠道 上皮的维稳，以及损伤或应激下肿瘤生成的多种生理病理事件。胃肠道是再生能力最强的 哺乳动物器官之一，小肠上皮细胞以2~5天的速度进行更新。因此，对肠道干细胞的研究 具有重要的意义。近年来有多项高水平的研究在相关领域中进行。

本公司生产的小鼠肠道干细胞采用混合酶消化和密度梯度离心制备而来，细胞总量约 为5×105/瓶，细胞纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、 酵母和真菌等。

7、培养基信息：

1）培养基类型：干细胞专用培养基

2）添加因子：FBS、Vc、Insulin、Penicillin、Streptomycin 等。

二、细胞特性

1)组织来源于实验动物的正常骨髓血组织。

2)细胞鉴定：CD44 免疫荧光染色为阳性

3)经鉴定细胞纯度高于 90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

三、产品的运输和保存

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL 冻存细胞悬液装于 1.8ml 的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80的条件下保存 1 个月。

2)T-25 培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过 85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

四、使用方法

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1、取出25cm2 培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37，5% CO2细胞培养箱中静 置4-6小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代

1)吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37温浴3min左右；倒置显微镜下观 察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；

3)用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全 培养基至5mL，放入37，5% CO2细胞培养箱中培养；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

五、注意事项

1、培养基于4条件下可保存3-6个月。

2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4、建议用户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部 沟通由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知 细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

5、该细胞只可用于科研。

备注：由于实验所用试剂与操作环境的不同，以上方法供各实验室参考。