HEp-2（人喉表皮样癌细胞）的操作流程与注意事项！

一、细胞简介

平台编号：Bio-73045

规格：1×10Cells/T25培养瓶

细胞信息：HEp-2

细胞名称：HEp-2（人喉表皮样癌细胞）

种属：人

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

背景描述：最初认为，HEp-2细胞源自喉上皮癌，但随后通过同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现，HEp-2细胞的起源是HeLa细胞污染的。HEp-2细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。

生长培养基：MEM＋10% FBS＋1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、HEp-2 (人喉表皮样癌细胞)生长条件

培养基       90%高糖DMEM+10S

血清         10%  FBS (Diagnovum )

温度         37

空气条件     5% CO2，95% AIR

冻存条件     培养基50%、血清40%、DMSO 10%

三、组成：

组成                 规格

细胞一瓶             T25

细胞培养与操作说明   1份

四、HEp-2 (人喉表皮样癌细胞)接收后的操作流程与注意事项

1、细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度，换液培养或传代。

2、如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞及时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基，培养2-3天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡，请及时联系实验室，技术人员会跟进解决。

3、贴壁细胞生长缓慢：适当提高血清浓度（最高不超过20%），或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养。

4、生长不均：贴壁细胞若出现生长不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重新打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

五、HEp-2 (人喉表皮样癌细胞)常规培养传代流程（请严格遵守无菌操作）

1、吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加1~2 ml 0.25% EDTA的胰酶消化（注意把握消化时间，通常控制在1~2min）。

2、镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁运动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml 完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。

3、取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，于培养箱中培养。

4、注意培养基PH值变化情况，定期换液，待细胞密度达到70-80%时重复传代操作或者冻存。

六、HEp-2 (人喉表皮样癌细胞)特别注意：（如使用公共实验室或初次接触细胞培养，建议添加双抗培养）

1、收到细胞后请尽快更换为含10% FBS的新鲜培养基，切勿使用原瓶中运输用培养基。

2、如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时拍照并联系实验室。

3、细胞任何售后问题，均需拍照存档并及时联系客服。