醋酸醋杆菌的培养条件与实验内容及保藏方法！

一、菌种简介

平台编号：Bio-60053

提供形式：冻干物

拉丁属名：Acetobacter Aceti

中文名称：醋酸醋杆菌

属名：Acetobacter

种名加词：aceti

来源历史：←甘肃省科学院生物研究所(30119)

收藏时间：2007.12.24

原始编号：Y6

资源归类编码：15131111101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；生产

具体用途：食用醋

特征特性：椭圆到短杆状，G-，单个，成双或成链，无芽孢，严格好氧。甘油、乙醇、乙酸钠产酸，果糖﹑乳糖﹑淀粉不产酸。接触酶阳性，氧化酶阴性，不液化明胶。氧化乙醇到乙酸，乙酸和乳酸氧化到CO2和H2O，最适温度30    

生物危害程度：四类

致病对象：无

培养基：蛋白胨 10.0g，牛肉浸膏 3.0g，NaCl 5.0g，葡萄糖 5.0g，琼脂粉 13.0g，蒸馏水定容至1L，pH 7.0。

培养温度：30

资源保藏类型：培养物

保存方法：真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：研究；生产；食用醋

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8冷藏。西林瓶菌种请置于-20冷冻。

三、培养条件

1、培养基编号：CM0831

2、培养基成分：蛋白胨 10.0g，牛肉浸膏 3.0g，NaCl 5.0g，葡萄糖 5.0g，琼脂粉 13.0g，蒸馏水定容至 1L，pH 7.0。

3、需氧类型：好氧

4、培养温度：30

四、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。

3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站。

六、保藏方法

1、传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3、载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4、寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5、冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30，-50-80）、干冰酒精快速冻结（约-70）和液氮（-196）等保藏法。

6、冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。