小鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物的背景与应用！

一、背景

小鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物是从小鼠肺大动脉平滑肌细胞提取的，小鼠肺大动脉平滑肌细胞从正常小鼠肺大动脉组织制备可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

小鼠肺大动脉平滑肌原代细胞分离自小鼠肺大动脉组织；肺大动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。

左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。肺大动脉平滑肌细胞是肺血管的重要结构细胞之一，在调控肺血管的收缩和舒张功能中有重要作用。肺大动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。

传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺大动脉平滑肌细胞的异常是肺动脉高压发生发展的重要病理学特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的关键。研究表明，急性和慢性缺氧均可导致肺动脉高压，即缺氧性肺动脉高压，推断缺氧可能是通过促进肺大动脉平滑肌细胞的增殖而参与缺氧性肺动脉高压的发生发展。

肺大动脉平滑肌细胞主要功能：细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺大动脉平滑肌细胞与主要病生理变化：平滑肌增生易致肺动脉高压；先天性肺动脉狭窄；肺动脉栓塞。

二、应用

小鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物可用于经典型蛋白激酶C亚型对低氧诱导的小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及机制研究：

肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）的过度增殖是低氧性肺动脉高压（HPH）所致肺血管重塑的基础病理变化,特别是远端肺小动脉的结构改变对HPH的发生发展具有重要意义。而低氧、多种生长因子等因素通过细胞内信号转导通路参与了细胞异常增殖过程的启动和调控。探明其病理发生机制,找到可能逆转HPH所致血管重塑的治疗靶点意义重大。近年来,基于蛋白激酶转导通路的调控受到广泛关注。在对蛋白激酶的相关研究中,发现经典型蛋白激酶C（cPKC）与低氧诱导的PASMCs异常增殖和HPH可能相关。

此外,随着小鼠基因动物模型应用于肺动脉高压疾病研究,建立稳定的小鼠远端PASMCs原代培养技术是细胞分子水平实验研究的基础。1.借鉴国外的PASMCs磁性分离培养方法,并加以改良,探讨建立稳定的小鼠远端PASMCs原代培养技术。2.利用原代培养的小鼠远端PASMCs建立低氧模型,探讨低氧对PASMCs增殖及cPKC各亚型表达的影响。3.通过药物干预或病毒转染体外原代培养的小鼠远端PASMCs,探讨cPKC特定亚型对低氧诱导的细胞增殖及ERK1/2、Akt表达的影响。