洋葱伯克霍尔德氏菌的注意事项及打管说明！

洋葱伯克霍尔德氏菌是革兰氏阴性杆状细胞，具有多根极端鞭毛，在TSA上菌落亮淡黄色，隆起，边缘整齐至不规则；在KMB上的 菌落淡黄绿色，无荧光,，在培养基上产生浅黄绿色非荧光扩散色素。主要用途是研究。

一、菌种简介

平台编号：Bio-107382

规格：甘油/培养物

拉丁属名：Burkholderia Cepacia

中文名称：洋葱伯克霍尔德氏菌

拉丁名称：Burkholderia cepacia

来源历史：ATCC

原始编号：ATCC 25416

模式菌株：是

主要用途：M22518

生物安全级别：GR2

培养基编号：2

培养温度：30

培养时间：24-48h

需氧类型：需氧

分离基物：洋葱

保存方法：冷冻干燥管保藏

用途：M22518

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

*营养琼脂培养基（NA）

*胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）

*LB 培养基（以上三款任选一种即可）

三、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20°C 保存。

四、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.2ml 左右培养液或无菌水溶解，接种在 2 个斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

五、打管说明书

1、开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖， 注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入 0.2ml适宜的液体培养基复溶冻干粉末。

2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；

3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。

4、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏（特殊除外）。

5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。