屎肠球菌的培养条件与注意事项及打管说明!
(2022-09-17 09:25:31)
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技术方法注意事项 |
分类: 微生物菌种 |
屎肠球菌(Enterococcus Faecium)属肠球菌属,是人及动物肠道中正常菌群的一部分,用屎肠球菌JT1701与人体肠系有害菌(大肠杆菌、产气荚膜梭菌、脆弱拟杆菌)和人体肠系益生菌(婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌)分别及共同培养发现,肠球球菌对这些菌均有抑制作用。
一、菌种简介
平台编号:Bio-84724
规格:冻干粉
拉丁属名:Enterococcus Faecium
中文名称:屎肠球菌
拉丁名称:Enterococcus faecium
来源历史:←保定某医院
收藏时间:2017/8/14
原始编号:Efm
原产国:中国
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;分析检测
特征特性:菌体球形,单个、成对或成不同长度链状排列,革兰氏阳性。菌落圆形、半透明、表面凸起,边缘整齐光滑,有光泽。携带耐药基因Van A。
具体用途:万古霉素耐药基因(van A)检测阳性质控菌株。
生物危害程度:四类
培养基编号:CM0006
培养基名称:MRS培养基
培养基成分:酪蛋白胨 10.0g,牛肉膏 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸钠 5.0g,柠檬酸二铵 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH6.8。
培养温度:37
需氧类型:好氧
采集地:河北省保定市
保存方法:-80冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享
提供形式:冻干物
用途:万古霉素耐药基因(Van A)检测阳性质控菌株。
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用产品信息以出库为准
二、储存条件
冻干菌种和试管斜面请置于 2-8冷藏。西林瓶菌种请置于-20冷冻。
三、培养条件
1、培养基编号:CM0006
2、培养基成分:酪蛋白胨 10.0g,牛肉膏 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸钠 5.0g,柠檬酸二铵 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH6.8。
3、需氧类型:好氧
4、培养温度:37
四、注意事项
1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站。
五、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒,将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热;立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位,使管壁破裂;再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取 0.5ml 适宜的液体培养基(液体培养基去掉琼脂即可),滴入安瓿管内,使冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4-5ml 液体培养基的试管中混匀,并取 100μL 转接到固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 2-8的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长。
4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。
5、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏(特殊除外)。
6、冻干管打开后需一次用完,不能留存。
7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。