红细胞裂解液的配方与作用！

细胞裂解液常用于细胞上游的操作。最常用的裂解液是RIPA，可用于提取细胞和组织中的可溶性蛋白（离心后提取上清）。但最近十年来，关于裂解液对实验的影响时有报道。如RIPA 裂解液可强烈影响IFN 抗原抗体间的结合，不宜用于ELISA 检测IFN 时细胞和组织样本的裂解。

红细胞裂解液的使用在动物试验中极其频繁，其与PBS、生理盐水、细胞培养基，并称实验室四大液体耗材。然而红细胞裂解液是如何达到裂解红细胞但是又不破坏其他有核细胞效果的呢。

红细胞裂解液的配方

实验室常用自配红细胞裂解液的主要成分为:碳酸氢钾（1g），氯化铵（8.3g）以及EDTA.2Na（0.037g），最终用KOH和HCl调节PH值至7.2-7.4（此配方为配制1000ml红裂液）。然后消高压，4储存、备用。

由于EDTA.2Na的用量很小，如果称取0.037g必定会造成较大的称量误差，所以我往往会准备一瓶EDTA.2Na的储存液（0.37gEDTA.2Na溶于1000ml ddH2O中，每次配置1000ml红裂液时从中吸取100ml储存液）

红细胞裂解液各个成分在裂解过程中的作用

氯化铵是红细胞裂解液中主要的效应物质，铵根离子不能透过细胞膜，而其他离子可以通过，这样就造成细胞内外离子浓度差异，形成了渗透压差，外部的水分会扩散至胞内，使细胞膨胀。由于红细胞结构相对简单，因此膨胀的耐受能力较差，绝大部分就会被涨破。碳酸盐的主要作用为PH缓冲。EDTA与镁离子和钙离子形成的螯合物主要起到破坏细胞膜稳态的作用，此作用对白细胞影响很小，所以这种裂解液可以在裂解红细胞的同时较小的影响白细胞。