动物溃疡伯杰氏菌的冷冻转接技术与方法！

动物溃疡伯杰氏菌是Bergeyella属的微生物，原产地为日本。本菌属于黄杆菌科。主要用途为分类学研究，具体用途为模式菌株。

菌种简介

平台编号：Bio-75162

规格：冻干物

拉丁属名：Bergeyella Zoohelcum

菌种名称：动物溃疡伯杰氏菌

拉丁文名：Bergeyella zoohelcum

其他编号：CGMCC 1.10447=NBRC 16014 =ATCC 43767 =LMG 8351

培养基编号：35

培养温度：30

用途：模式菌株

分离源：人唾液，日本

生理生化特征：DNA

相关的培养基详细信息如下：

培养基编号：35

名称：Blond Agar (血琼脂培养基)

备注：Peptone (蛋白胨) 10g Glucose (葡萄糖) 2g NaCl 5g NaH2PO4 2.5g Sodium citrate (柠檬酸钠) 5g Brain infusion (脑浸汁) 800ml Pig heart infusion (猪心浸) 200ml Sleep Blood (羊血) 10% pH 7.2 [Note]：Preparation of pig brain and pig heart infusion： （1） Smash up 100g fresh pig heart （without fat and blood vessel）.Add distilled water up to 1000ml; （2） Cut 200g fresh pig brain (without blood vessel). Add distilled water up to 1000ml; （3） Keep the two infusions at 50 for 1 hr , then boil for 15 minutes; （4） Cool and filtrate through gauze . [注]猪心和猪脑浸汁法：（1）新鲜猪心除去心头和脂肪，搅碎100克加蒸馏水至1000毫升；（2）新鲜猪脑除去血管，取200克加蒸馏水至1000毫升；（3）50保温1小时，然后煮开15分钟；（4）冷却后用纱布过滤备用。

用途：模式菌株

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

动物溃疡伯杰氏菌冷冻干燥保藏转接技术：

建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。

1、安瓶管开封

用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿管。

用火焰将安瓿管顶端加热。

滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。

用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。

2、菌株恢复培养

用无菌吸管，吸取0.3-0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻轻振荡,使冻于菌体溶解呈悬浮状，取0.1-0.2ml菌体悬浮液，移植于适宜的琼脂斜面/平板培养基上，剩余的菌液，注入适宜的液体培养基内，然后在建议的温度下培养。  

3、注意事项

菌种活化前，请将安瓿管保存在6一10的环境下。

厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。

某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长,此时请将步骤二重复一次。

动物溃疡伯杰氏菌转接方法：

真菌转接需使用的接种工具为接种钩、铲，其样式大小见图1。制造的金属可用铂丝或镍丝，也可使用电炉丝，原则是软硬度适当，能经受反复火焰烧红。接种真菌的接种钩、铲，其丝的直径以1毫米比较适合。步骤：右手执针（铲、钩等），左手执管，烧针灭菌，拔塞烧口，挑菌移植，烧口塞管，烧针灭菌等。

右手执接种钩、铲，使前端细丝的部位全部在火焰上烧红杀菌，左手执斜面试管，试管口在拔塞前快速通过火焰，不要使试管口过热；

接种钩、铲前端细丝的部位全部烧红后插入70%无菌酒精里，拿出再烧红，空气中自然冷却或放入70%无菌酒精瓶内冷却，再将接种钩、铲前端细丝的部位快速通过火焰除去酒精；

用接种接种钩、铲挑取菌块移植到新的斜面培养基上（斜面试管管口灭菌）后；

试管口和塞子快速通过火焰灭菌，不要使试管口过热或使棉塞着火；

斜面试管口塞紧硅胶塞或棉塞，将接种钩、铲接触真菌的部位烧红后放入70%无菌酒精瓶中；

接种后的试管放25（无特殊温度要求的真菌）培养箱培养。