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肠杆菌属的细菌特性与培养方法及实验内容!

(2022-06-17 09:46:51)
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知识

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分类: 微生物菌种

         肠杆菌属的细菌特性与培养方法及实验内容!

 


肠杆菌属拉丁学名(Enterobacter Hormaeche and Edwards,1960) 直杆状,宽0.6~1.0μm×1.2~ 3.0μm,符合肠杆菌科的一般定义。革兰氏阴性,周生鞭毛(通常4~6根)运动。

 

菌种简介

平台编号:Bio-090901

规格:冻干物

拉丁属名:Enterobacter Sp.

中文名称:肠杆菌属

拉丁名称:Enterobacter sp.

菌株保藏编号:CICC 24391

来源历史:←中国科学院成都生物研究所

收藏时间:2018/1/15

原始编号:l.10.9.43.4

原产国:中国

资源归类编码:15131122105

模式菌株:非模式菌株

主要用途:研究

特征特性:菌体形态短杆状,单个、成对或短链排列,G-。在CM0369琼脂培养基上可发酵产酸,菌落圆形,较湿润,易挑取。发酵蔗糖产酸,发酵蔗糖产乙醇。

具体用途:发酵泡菜。产乙醇。

生物危害程度:四类

培养基编号:CM0369

培养基名称:肠膜明串珠菌培养基

培养基成分:Na2HPO4 1.4g,蔗糖 100.0g,蛋白胨 2.5g,KH2PO4 0.3g,琼脂20.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0~7.2。

培养温度:30

需氧类型:好氧

分离基物:泡菜水

采集地:四川省成都市武侯区

保存方法:-80冰箱冻结法;真空冷冻干燥法

共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享

提供形式:冻干物

用途:发酵泡菜。产乙醇。

注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

 

细菌特性

肠杆菌属,兼性厌氧,容易在普通培养基上生长。发酵葡萄糖,产酸产气(通常CO2H2=21)。在 44.5时不能由葡萄糖产气。大多数菌株VP试验阳性, MR试验阴性。一般可利用柠檬酸盐和丙二酸盐作为惟一的碳源和能源。不从硫代硫酸盐产生H2S。多数菌株可将明胶缓慢液化,不产生脱氧核糖核酸酶。最适生长温度为 30,多数临床菌株在37生长,有些环境菌株37时生化反应不稳定。广泛分布于自然界,普遍存在于人和动物中。 DNA的G+C mol%为52~60(Bd)。模式种:阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacea)。

 

菌种的培养

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

 

实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌


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