肺炎克雷伯氏菌的保藏条件与注意事项及打管说明！

一、菌种简介

平台编号：bio-52829

拉丁属名：Klebsiella pneumoniae

菌株名称：肺炎克雷伯氏菌

其他编号：CMCC46117

培养基编号：2

培养温度：35-37

培养时间：18-24 小时

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、培养基

*营养琼脂培养基（NA）

*胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）

*LB 培养基（以上三种任选一种即可）

三、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20°C 保存

四、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.2ml 左右培养液或无菌水溶解，接种在 1-2 个斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）斜面菌种保藏时间通常为 3-6 个月；应根据菌种状况及时转接；冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

五、冻干管打管说明书

1、西林瓶开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖，注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入0.2ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。

2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；

3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。

4、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏（特殊除外）。

5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。