侧孢短芽孢杆菌的生防特点与保藏方法！

侧孢短芽孢杆菌，在延迟期， 短芽孢杆菌为革兰氏染色阴性，菌体呈细长的杆状；在对数生长期，为革兰氏染色阳性，菌体成短而粗的杆状；在静止期，革兰氏染色又转为阴性，菌体成细长的杆状，偶尔也能观察到椭圆形的芽孢。图1是50号菌用1%H2SO4(pH6.8)负染后的电镜照片：菌体杆状、周生鞭毛、大小约0.88μm×2.2μm。

菌种简介

平台编号：Bio-59492

提供形式：冻干物

拉丁属名：Brevibacillus Laterosporus

中文名称：侧孢短芽孢杆菌

属名：Brevibacillus

种名加词：laterosporus

来源历史：←中国农业大学食品学院(LQ61)

收藏时间：2007.1.31

原始编号：TF1

资源归类编码：15131311101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；生产

具体用途：抑制金黄色葡萄球菌

特征特性：杆状，G+，形成椭圆形内生芽孢，好氧。可耐1%-7%NaCl浓度。麦芽糖、半乳糖、木糖、果糖产酸；葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、棉子糖不产酸。不分解淀粉，接触酶、氧化酶阳性。    

生物危害程度：四类

致病对象：无

分离基物：土茯苓

采集地：北京

培养基：酵母提取物 0.5g，甘露醇 20.0g，KH2PO4 0.2g，K2HPO4  0.8g，MgSO4.7H2O 0.2g，CaSO4·2H2O 0.1g，FeCl3 微量，Na2MoO4·2H2O 微量，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.2。

培养温度：35-37

资源保藏类型：培养物

保存方法：真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

源数据主键：21185

用途：研究；生产；抑制金黄色葡萄球菌

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

生防特点

作为非脊椎动物的病原菌，有关研究人员曾报道了这种细菌的杀线虫能力，由于所报道的这些侧孢短芽孢杆菌菌株都不产生伴孢晶体，所以这些菌株的杀线虫毒力因子并非来自于具有特征性的伴孢晶体。然而，Smirnova TA，et al.分离到了2株能形成大的伴孢晶体的侧孢短芽孢杆菌菌株，这两株菌显示出很强的杀昆虫能力，研究证实，这种能力与菌体在形成芽孢过程中的伴孢晶体相关。有趣的是，Singer的实验表明，一株侧孢短芽孢杆菌的杀线活性源于一个热稳定蛋白的毒性。所有这些研究表明，不同侧孢短芽孢杆菌菌株拥有不同的线虫致病因子。牛秋红研究小组分离到的侧孢短芽孢杆菌G4菌株具有显著的杀线虫功能，但其并不产生伴孢晶体。从该菌株的发酵液里提取的粗蛋白酶液在12h内能杀死所有测试线虫并在24h内完全降解。从侧孢短芽孢杆菌G4菌株中纯化出的丝氨酸胞外蛋白酶可水解多种底物，包括胶原和线虫体壁，具有很强的杀线虫能力，组织病理电镜实验证实这种蛋白酶严重破坏了线虫体壁。而且，蛋白酶将线虫体壁分解成为一些氨基酸或小肽，这些营养物使病原细菌更好的生长繁殖。该蛋白酶基因异源表达的菌株表现出了明显的杀线虫活性，重组蛋白酶在体外对线虫体壁降解，而蛋白酶缺失菌株丧失了大部分的杀线活性，死亡线虫在生测中保持了完整的体壁，表明蛋白酶在线虫侵染中起主要作用。

保藏方法

1、传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3、载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4、寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5、冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30，-50-80）、干冰酒精快速冻结（约-70）和液氮（-196）等保藏法。

6、冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。