人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞的处理与培养方法！

细胞简介

平台编号：bio-81818

规格：5×10cells/T25培养瓶

拉丁属名：SK-OV-3/DDP

细胞名称：SK-OV-3/DDP（人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞）

种属：人

年龄（性别）：

组织来源：卵巢腺癌

生长特性：细胞形态

生长培养基：McCoy's 5A(货号:PM150710)＋DDP＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞接收后的处理方法

1、冻存细胞接收后的处理：

1）干冰运输，收到细胞后立即转入液氮或直接复苏；

2）收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

2、复苏细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2）75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

3）建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

4）如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞培养方法

1）细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2）细胞复苏：

将冻存管在37温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好是进行细胞冻存

弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入2ml0.25%胰酶（T25瓶）

1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

将冻存管放入程序降温盒，放入-80冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。