用于产生维生素B12的：巨大芽孢杆菌

巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary，1884)：杆状，末端圆，单个或呈短链排列。1.2-1.5×2.0-4.0微米，严格好氧，能运动，革兰氏阳性，芽孢1.0-1.2×1.5-2.0微米，椭圆形，中生或次端生。芽孢从椭圆形到长形不等；不能生成乙酰甲基甲醇；菌株能运动，但运动缓慢，需要游离氧；发酵葡萄糖产酸；DNA的G+C含量为36%-38%。

一、菌种简介

平台编号：bio-51770

规格：冻干物

拉丁属名：Bacillus megatherium de Bary

中文学名：巨大芽孢杆菌

拉丁学名：Bacillus megateriumde Bary，1884

二名法：Bacillus megaterium

界：细菌界

门：厚壁菌门

其它编号：AS1.127

培养基编号：2

培养温度：30

培养时间：18-24 小时

用途：维生素B12产生菌

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、培养基

*营养琼脂培养基（NA）

*胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSA）

*LB 培养基（以上三款任意选择一种）

三、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20°C 保存。

四、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种在 1-2 个斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

五、单层冻干管打管说明书

1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；

3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说，菌种稳定后才能用于您的后续实验。

4、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏（特殊除外）。

5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。