豌豆根瘤菌的生物现状与注意事项！

豌豆根瘤菌，在贵州江口梵净山省溪司采集的豇豆根瘤中分离；化能异养菌；革兰氏染色阴性；生长速度较快，菌落为圆形，半透明，粘稠；利用碳源较为广泛，能利用硝态氮、氨态氮和有机氮为氮源生长；在甘露醇或其它碳水化合物培养基上生长产酸，产生大量胞外多糖粘液。

一、菌株简介

平台编号：bio-51833

规格：斜面培养物

拉丁属名：Rhizobium legumiunosarum (Frank) Frank

中文学名：豌豆根瘤菌

拉丁学名：Rhizobium leguminosarum

界：细菌界

门：变形菌门

其它编号：M1.38b

培养基编号：9

培养温度：25-28

培养时间：18-24 小时

用途：研究

分类地位：菌物界 > 变形菌门 > α变形菌纲 > 根瘤菌目 > 慢生根瘤菌科 > 豌豆根瘤菌属

保护级别：未列入

濒危等级：无危

可信度：1级可信度

野生驯化：家养/栽培

水生陆生：陆生

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

二、生物现状

保护及保存现状：人工保存

主要用途和价值：与豌豆共生固氮

开发利用现状：未开发利用

保护建议：不详

遗传多样性：不详

三、培养基

*YEB

四、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20°C 保存。

五、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 适宜的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板或者斜面,或直接液体培养）；

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理；

8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

10）西林瓶开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖， 注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入 0.2ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。