戊糖片球菌单层冻干管打管说明书！

戊糖片球菌，圆形菌落，乳白色，光滑，凸起，边缘整齐，不透明，革兰氏阳性，球菌。戊糖片球菌（P.pentosaceus），细胞球状，直径0.8~1.0μm。最适生长温度35，最高生长温度42~45。对啤酒花防腐剂敏感。分布于麦芽汁及发酵植物材料中，如酸腌菜、泡菜、青贮料等中。

一、菌种简介

平台编号：bio-67860

规格：冻干物

拉丁属名：Pediococcus pentosaceus

菌株名称：戊糖片球菌

其它编号：ATCC 33316

培养基编号：35

培养温度：37

培养时间：18-24 小时

用途：研究

分离源：干啤酒酵母

培养基信息

培养基编号：35

名称：Blond Agar (血琼脂培养基)

备注：Peptone (蛋白胨) 10g Glucose (葡萄糖) 2g NaCl 5g NaH2PO4 2.5gSodium citrate (柠檬酸钠) 5g Brain infusion (脑浸汁) 800mlPig heart infusion (猪心浸) 200ml Sleep Blood (羊血) 10%pH 7.2 [Note]：Preparation of pig brain and pig heart infusion：（1） Smash up 100g fresh pig heart （without fat and blood vessel）.Add distilled water up to 1000ml;（2） Cut 200g fresh pig brain (without blood vessel). Add distilled water up to 1000ml;（3） Keep the two infusions at 50 for 1 hr , then boil for 15 minutes;（4） Cool and filtrate through gauze . [注]猪心和猪脑浸汁法：（1）新鲜猪心除去心头和脂肪，搅碎100克加蒸馏水至1000毫升；（2）新鲜猪脑除去血管，取200克加蒸馏水至1000毫升；（3）50保温1小时，然后煮开15分钟；（4）冷却后用纱布过滤备用。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

保藏条件：斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。

二、培养基

血琼脂平板

三、保存方法

1、沙土保存法，能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4冰箱保存，保存期可达5～7年。

2、冷冻干燥法，将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。

3、石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。

四、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留。用 0.3-0.5ml 的培养液或者无菌水溶解，接种在 1-2 个平板上，因冻干菌种处于休眠状态，请勿接种多个平板，以免因接种量不足而导致复苏不成功。如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接；冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

五、单层冻干管打管说明书

1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；

3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说，菌种稳定后才能用于您的后续实验。

4、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏（特殊除外）。

5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。