食品微生物检验技术：液体石蜡法！

液体石蜡法是定期传代法辅助法。由于培养物表面覆盖液体石蜡后可隔绝空气，因此降低了微生物菌体的物质代谢，延缓细胞的衰老，同时也防止培养基水分蒸发，是一种简易的菌种保藏方法。亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上，最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于低温（4～6）干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。

操作步骤如下：

1、液体石蜡的准备

选用优质化学纯液体石蜡，将液体石蜡分装加塞，用牛皮纸包好，采用以下两种方式进行灭菌：

121湿热灭菌30min，置40恒温箱中蒸发水分，经无菌检查后备用。

160干热灭菌2个小时，冷却后，经无菌检查后备用。

2、斜面培养物的制备   

参照定期移植法。

3、灌注石蜡  

将无菌的液体石蜡在无菌条件下注入培养好的新鲜斜面培养物上，液面高出斜面顶部1cm左右，使菌体与空气隔绝。

4、保藏

注入液体石蜡的菌种斜面以直立状态置低温（4～6）干燥处保藏，保藏时间2～10年。

保藏期间应定期检查，如培养基露出液面，应及时补充无菌的液体石蜡。

5、恢复培养   

恢复培养时，挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上，生长繁殖后，再重新转接一次。

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