加载中…靶基因鉴定-luciferase报告基因表达载体的构建与表达
(2019-03-14 14:01:54)
标签：
luciferase基因表达靶基因 |
分类： microRNA功能研究 |
简介
当miRNAs与靶基因的3’ UTR结合后，主要抑制mRNA的翻译，可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平；也有部分表现为对标靶mRNA的降解，可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法，都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测，莱德盟的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒，对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。
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服务优势
服务流程
PCR扩增靶基因的3’UTR，或直接合成结合位点序列（1-3次重复）；
将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒；
合成miRNA 模拟物；
将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞；
多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。
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服务流程
PCR扩增靶基因的3’UTR，或直接合成结合位点序列（1-3次重
将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒；
合成miRNA 模拟物；
将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞；
多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。
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