浅谈植物悬浮细胞培养
					
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                            悬浮细胞系植物悬浮细胞培养 | 
					分类: 悬浮细胞系 | 
 
 
悬浮细胞系优势
http://s6/bmiddle/007eE9R1zy7oFU6zvrTc5&6901、悬浮细胞生长速度快:
 
http://s10/bmiddle/007eE9R1zy7oFU7gvB7a9&6902、悬浮细胞的稳定性高:
 
http://s12/bmiddle/007eE9R1zy7oFU8ovijeb&6903、悬浮细胞在优化实验方面的优势:
 
 
应用于亚细胞定位
悬浮细胞应用于瞬时表达
| 操作方法 | 前期准备 | 转染 | 检测 | 
| 传统方法 | 种植植株 | 注射叶片 | 叶片制片 | 
| 优势 | 种植技术成熟 | 技术成熟 | |
| 劣势 | 周期较长,受环境影响较大,占地面积大 | 操作时间长,转化时间长 | 操作不方便,细胞不规则 | 
| 悬浮细胞 | 维持细胞系 | 混合细胞 | 细胞制片 | 
| 优势 | 随用随取,占地小 | 操作方便,转化时间短 | 操作方便,细胞大二规则,结果更直观。 | 
| 劣势 | 建立周期长,维系难度大,设备成本高 | 无叶绿体 | 
| 传统方法 | 悬浮细胞 | |
| 材料准备 | 种植1~2个月 | 长期维持,随取随用 | 
| 操作时间 | 5~10 分钟 | 5~10秒钟 | 
| 实验周期 | 3~5天 | 2~3天 | 
| 材料体积 | 一盆植株 | 1~3 mL细胞悬浮液 | 
| 优势 | 应用成熟 | 实验周期短,技术水平高,部分实验结果更直观。 | 
悬浮细胞系应用于稳定表达--以拟南芥为例
| 实验操作 | 拟南芥 | 实验操作 | 悬浮细胞 | 
| 待发芽开花 | 14天 | 构建基因载体 | 3~5天 | 
| 花盘转染至收种 | 30天 | 农杆菌转化 | 1~3天 | 
| 收种筛选(T0) | 40天 | 阳性筛选及分化结种(T1) PCR鉴定 | 40天 | 
| 阳性种(T1)PCR鉴定 | 40 天 | ||
| 实验周期 | 3~4个月 | 实验周期 | 2~3个月 | 
| 缩减实验周期 | 3个月 | 缩减实验周期 | 2月左右 | 
悬浮细胞系应用于稳定表达--以水稻为例
| 实验阶段 | 以种子为材料 | 以悬浮细胞为材料 | 
| 诱导愈伤 | 14天 | 无(另需3~5天构建表达载体) | 
| 继代 | (10~20)*N 天 | 0~5天 | 
| 侵染 | 3~5 天 | 1~3天 | 
| 筛选 | 14天 | 14天 | 
| 分化 | 15天 | 15天 | 
| 3~5天 | 3~5天 | |
| 总周期 | 2~3个月 | 1~2个月 | 

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