1.慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞以1×10 ^ 5 /孔的速率铺展到24孔板中，慢病毒转染过程中的细胞数约为2×10 ^ 5 /孔。
2.第二天，用2 ml含6μg/ ml聚乙烯的新鲜培养基替换原始培养基，并添加适量的病毒悬浮液，在37°C下孵育。
3.（此步骤选择对聚乙烯毒性敏感的细胞）4小时后，添加2ml新鲜培养基稀释聚乙烯。
4.继续培养24小时，用新鲜培养基代替含病毒的培养基。
5.继续培养。如果慢病毒包含荧光蛋白，则转染后48小时通常会显示明显的荧光表达，而72小时后会更加明显，如果需要FACS检测转染效率，可以在转染后72-96小时进行，如果慢病毒包含抗性基因并且需要用药物进行筛选，则可以在转染后3-4天开始使用药物。