交联葡聚糖凝胶制备及使用方法
(2020-02-26 15:04:52)
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蛋白葡聚糖凝胶交联葡聚糖凝胶乙酸乙烯酯 |
SephadexG交联葡聚糖的商品名为Sephadex。英文字母G表示不同规格和型号的右旋糖酐。G后面的阿拉伯数字是凝胶水值的10倍。例如,G-25每克凝胶吸收2.5克水,而G-200每克干胶吸收20克水。交联葡聚糖凝胶的类型是G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150和G-200。因此,“ G”反映了凝胶的交联度,溶胀度和分布。
制备:
葡聚糖凝胶微珠具有两个缺点:颗粒聚集和表面粗糙度。颗粒附聚的原因是分散剂聚乙酸乙烯酯(PVAc)在碱性条件下水解以增强亲水性,并且交联反应的中间产物发生絮凝。另外,交联后颗粒粘度的增加也可能引起聚集。葡聚糖微珠的粗糙表面是由于在后处理过程中未完全从微珠表面除去PVAc的微小附着物而引起的。作者采用低温分散,交联,逐步添加交联剂以及调节搅拌速度等方法来有效地控制上述问题。
使用:
在室温下用0.2N HCl浸泡12小时,在间隙中搅拌,过滤干燥,然后洗涤至中性。
难以分离的物质应具有一定的色谱柱高度和流速控制。脱盐时,高径比可以为5:1。洗脱;梯度洗脱液(如NaCl或盐梯度洗脱液)也可以在上层色谱柱缓冲液中完全分离和纯化。

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