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卵清蛋白如何提取

(2019-03-01 11:41:50)
标签:

卵清蛋白

吉至试剂

化学试剂

生物试剂

蛋清中的主要蛋白质包括卵清蛋白、卵转铁球蛋白、类卵沾蛋白、卵沾蛋白、溶菌酶、球蛋白G2、球蛋白G3等。卵清蛋白等电点4.5,其本质是含磷糖蛋白。卵清蛋白是蛋清中的主要蛋白组分。

卵清蛋白是一种优质蛋白质,占蛋清蛋白总量的 54%-69%,卵清蛋白是典型的球蛋白,分子量为 44.5k Da,属含磷糖蛋白,有四个自由巯基385 个氨基酸残基。这些氨基酸残基相互缠绕折叠形成具有高度二级结构的球型结构,大部分为α-螺旋和β-折叠。卵清蛋白中心有 1 个二硫键和 4 个巯基,当加热时暴露出来,通过分子间相互作用使卵清蛋白胶体结构变得更稳定。

操作步骤
1,取新鲜鸡蛋两只,得蛋清50ml,置于烧杯中放置在25-30的水中,不断搅拌条件下,缓慢加入等体积得三氯乙酸-丙酮(1:2V/V),立即出现大量白色絮状沉淀,加完后最终PH约3.5,继续搅拌30min,然后在4冰箱中放置过夜。
2,次日用漏斗抽滤,得黄绿色清液。
3,边搅拌边加入4预冷的丙酮200ml沉淀蛋白,在4放置2h之后将上清液小心倒入瓶中回收,下部沉淀部分于4000rpm离心5min,收集沉淀。
4,将沉淀溶于10ml无离子水中,对无离子水(50倍)透析4h,换水两次,再对碳酸钠缓冲液透析过夜,4000rpm离心10min ,去除不溶物。

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