Fluo-4 AM 是一种常用的检测细胞内 Ca2+ 浓度的探针。储存方式：避光。

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　　NP细胞用5 μM Fura-4-AM在37°C的黑暗条件下孵育30分钟。使用特定的Ca2+敏感荧光指示剂Fura-4-AM测量细胞内Ca2+水平，并通过荧光显微镜进行分析

　　生物活性

　　体外研究

　　fluo - 4am是一种荧光染料（λex=494 nm， λem=516 nm）。预加载fu -4 AM，观察到非常明亮的荧光图像。在装载了氟-3 am的细胞的平行实验中，得到的荧光图像虽然在这种情况下清晰可辨，但亮度较低。指导方针（以下是我们推荐的方案。本协议仅提供了一个指南，应根据您的具体需求进行修改）。

　　1. 细胞计数，每个样品取106个细胞（对照和实验/秒）。

　　2. 收集细胞（5分钟，3000×g, 4°C），在PBS中洗涤一次。

　　3.将细胞重悬于0.5 ml PBS中，加入0.5 μl Fluo-4-AM （1 mM原液）至终浓度为1 μM。37孵育1小时。

　　4. 用PBS洗涤细胞三次（2分钟，3000×g），最后用1ml PBS重悬。分离成2根流式细胞仪管，每根0.5 ml。

　　5. 用流式细胞术评价染色结果，用CellQuest等软件分析数据。

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

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　　通过酶切分离心肌细胞，并在37°C下负载Fluo 4-AM （5 μM） 20 min。用共聚焦显微镜记录Fluo 4-AM在25°C下的荧光变化。

　　实验参考方法

　　细胞试验

　　为了测量悬浮细胞的荧光，将大鼠嗜碱性白血病（RBL）细胞培养物的细胞稀释至2至3×106。细胞悬浮于1 μM染料（包括fluo - 4am）中，37°C孵育30分钟。然后将细胞悬浮液转移到培养皿中，用荧光光谱仪测量荧光发射强度。

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。