实验二   用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动 

一、      教学目标：

1.练习使用显微镜，掌握高倍显微镜的使用方法。

2.观察叶绿体的形态和分布。

3.通过在显微镜下的实际观察，理解细胞质的流动是一种生命现象。

二、      实验原理：

1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中，叶绿体一般是绿色的，扁

平的椭球形或球形，可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。

2.活细胞中的细胞质处于不断流动的状态。观察细胞质的流动，可用细胞

质基质中的叶绿体的运动作为标志。

三、      材料用具：

藓类的叶（或菠菜叶）、新鲜的苦草（或黑藻）

显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、刀片、培养皿

四、      实验步骤：

1、观察叶绿体装片：

取材：取一片藓类小叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮

制片：载玻片中央滴一滴清水，将叶片放入，加上盖玻片，制成临时装片

观察：先低倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体的形态和分布 

[光强度的变化与叶绿体的位置关系]

2、用显微镜观察细胞质的流动：

取材：将黑藻先放在光下、25℃左右的水中培养（生成足量叶绿体）

制片：载玻片滴水、放叶，加盖玻片，制成临时装片

观察：先低倍镜找到黑藻叶片细胞，后高倍镜观察到细胞内的叶绿体随细胞质液定向呈环形流动[适当增强光照、适当提高温度、切伤等均可加速流动。]

注意事项

1）选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键，因为藓类属阴生植物，菠菜叶的下表皮是菠菜叶的背阳面，这样的细胞中的叶绿体大且数目少，便于观察。

2）实验过程中的临时装片要始终保持有水状态，目的是为了防止叶绿体失水。如果叶绿体失水，叶绿体就缩成一团，无法观察叶绿体的形态和分布。

3）正确使用低倍镜：取镜——对光——安放装片——下降镜筒——调焦。下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压坏装片和碰坏物镜。

4）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像移到视野中央——转动转换器，换用高倍物镜——调整光圈和反光镜，使视野亮度适宜——调节细准焦螺旋，直至物像清晰。

注意事项：

1）课前应检查实验材料，以便做到心中有数。观察细胞质的流动，理想的实验材料是黑藻。实验前教师必须检查供实验用的黑藻叶片细胞质的流动情况，如果发现细胞质不流动，或者流动很慢，应立即采取措施，加速其细胞质的流动。方法有三种，可以任选一种。一是进行光照，即在阳光或灯光下放置15～2Omin；二是提高盛放黑藻的水温，可加入热水将水温调至25℃左右；三是切伤一小部分叶片。

2）观察细胞质流动时，首先要找到叶肉细胞中的叶绿体，然后以叶绿体作为参照物，在观察时眼睛注视叶绿体，再来观察细胞质的流动。最后，再来仔细观察细胞质的流动速度和流动方向。

3）细胞质流动与新陈代谢有密切关系，呼吸越旺盛，细胞质流动越快，反之，则越慢。细胞质流动可朝一个方向，也可朝不同的方向，其流动方式为转动式（旋转式、环流式）。这时细胞器随细胞质基质一起运动，并非只是细胞质的运动。 

4）寻找最佳观察部位：应寻找靠近叶脉部位的细胞进行观察，此处细胞水分供应充足，容易观察到细胞质的流动。

5）装片中的实验材料，应始终保持有水状态。使用表皮或表皮观察细胞流动时，应将视野调暗些。

6）如果一时不到细胞质流动的细胞，可以把载玻片在白炽灯泡下短时间烘热，稍稍提高材料温度后再观察。