一.   服务介绍                              

目的  

       1.了解并掌握酸性磷酸酶定位的原理及操作步骤; 2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布。    二、原理   酸性磷酸酯酶(Acid Phosphatase)存在于植物的种籽、霉菌、肝脏和人体的前列腺之中，能专一性地水解磷酸单酯键。

        PO43-+Pb(NO3)2 -----Pb3(PO4)2 ↓（沉淀）            

       Pb3(PO4)2 +(NH4)2S----PbS   ↓(棕黑色) 

二.实验方法以及试剂                         

材料     

       新鲜蒜苔，新鲜青菜的全根系组织；

试剂     

         磷酸缓冲液PH=7.2，丙酮，底物溶液，(NH4)2S试剂，邻苯二酚，蒸馏水等  

仪器和用具 

       恒温水箱、显微镜、烧杯、大小培养皿、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、吸水纸等等。

三.实验方法以及步骤                        

新鲜蒜苔的酸性磷酸酶组织定位：

        A.  徒手切片蒜苔（使切片尽量薄而透明），将切片放入装有干净蒸馏水的培养皿中备用；

        B.  挑选适宜的蒜苔切片，将其放入4℃的丙酮中，固定15 min后用蒸馏水清晰切片1-2次； 

        C.  将洗好的切片移入装有底物溶液的试管中，在37℃下水浴1h； 

        D.  水浴完成后，将切片用蒸馏水洗3次，加入0.5%的(NH4)2S溶液，放置1-2 min后，再次用水将切片洗净；

         E.  将切片转移至载玻片上后，进行镜检。 

新鲜青菜根系的酸性磷酸酶组织定位： 

        A.  将完整的青菜根系用蒸馏水清洗干净，放入装有PBS（磷酸缓冲液，PH=7.2）的烧杯中，在室温下放置5 min；

        B.  将根系放入1%的邻苯二酚液中，在37℃下水浴1h-2h; C.  水浴过后将根系取出，观察并拍照

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