对于实验室有所了解的人相信大家都知道，PCR实验室最主要的还是各房间的气流压差控制，特别是扩增和产物区的气流是不能相互串通的，以免引起交叉污染，检测提取数据重叠失效等。(对于房间的洁净度要求可以定位准洁净室标准和十万级标准即可);所以根据PCR操作流程方向，试剂准备，标准制备，扩增区，产物分析区。相对压差也应从试剂 准备至产物分析方向由高到低的过程。不过在实际的使用调剂过程中我们会遇到缓冲的气压很难调到设定值，若扩增和产物缓冲区的—5~—10Pa，在调试过程中会出现压差不平衡的问题，比如洁走廊往缓冲方向流入缓冲就是小负压室，缓冲再被动流入负压内室就应变为正压，从而缓冲间排风大于送风量，也就是送风设置为关闭状态后基本可以实现负压的设定值，因此关闭送风维持负压状态是不可行的.

其实我们只要了解PCR关键性能后也可以取另外的方式来实现气流合理性的控制，比如PCR缓冲间理解为第二气阀室(室内与缓冲间是两层隔离屏障，洁净走廊对外是第一层屏障)，所以缓冲间的设置为相对或者绝对的正压值是很有必要也是符合使用标准的。

对于无菌负压洁净间我们经常会碰到尘埃粒子检测不达标的问题，本人经过多次的现场考察和多年的检测技术经验可以得出以下两个问题：尘埃粒子问题，房间的负压设定值越高其洁净难度也就会越高，对于我们施工的工艺要求也就越高，顾名思义负压洁净间的大气压要比室外空气大气压力低，洁净间根据要求设计负压值越高，相对室外大气压值就会相差越大，如果施工工艺不到位就会导致负压洁净间的墙壁接缝，照明灯具电源线孔，吊顶板材开孔的高翔箱体缝隙，墙壁开孔的强弱电插座即插座孔等都是室外非经过处理的气压空气进入负压洁净间的路径，从而导致负压洁净间的尘埃粒子超标的现象。

PCR实验室各区功能及主要设备

1、试剂准备区：主要进行试剂的制备、分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区，不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、混匀器等。

对于气流压力的控制，本区并没有严格的要求。

2、样品制备区：主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、混匀器、水浴锅等。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。

3、扩增区：主要进行DNA扩增。此外，已制备的DNA模板 (来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有：扩增仪、加样器、消毒车。

本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。

4、扩增产物分析区：扩增产物的测定。本区主要设备有电泳仪、微波马弗炉、加样器、超净工作台、凝胶成像分析系统等。

本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。