水中细菌总数的测定（二）_橡緗煜竹

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水中细菌总数的测定（二）

(2016-06-27 17:10:36)

标签：

365 北京标准物质网

细胞菌种保藏中心

水中细菌总数的测定（二）

【来源/作者】北纳创联【更新日期】2016-06-27

http://www.biaowu.com/html_news/news_18312.html

一、操作步骤

1．水样的采取

1)自来水

先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开放水龙头使水流5min后，以火菌三角烧瓶接取水样，以待分析，另可参见GB／T 5750．2—2006((生活饮用水标准检验方法水样的采集和保存》。

2)池水、河水或湖水

应取距水面10～15cm的深层水样。先将灭菌的带玻璃塞瓶瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流人瓶中。盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出。最好立即检查，否则需放人冰箱中保存。

2．细菌总数测定

1)自来水

(1)用灭菌吸管吸取1mL水样，注入灭菌培养皿中，共做两个平皿。

(2)分别倾注约15mL已熔化并冷却到45℃左右的牛肉膏朊胨琼脂培养基，并立即在桌上作平面旋摇，使水样与培养基充分混匀。

(3)另取一空的灭菌培养皿，倾注牛肉膏朊胨培养基15mL，作空白对照。

(4)培养基凝固后，倒置于37℃温箱中，培养14h，进行菌落计数。

两个平板的平均菌落数即为1mL水样的细菌总数。

生活饮用水微生物指标标准检验方法可参考GB／T 5750．12—2006 。

2)池水、河水或湖水等

(1)稀释水样：取3个灭菌空试管，分别加入9mL灭菌水。取1mL水样注入第一管9mL灭菌水内、摇匀，再自第一管取1mL。至下一管灭菌水内，如此稀释到第三管，稀释度分别为10^-1、10^-2与10^-3。稀释倍数视水样污浊程度而定，以培养后平板的菌落数在30~300个之间的稀释度最为合适，若三个稀释度的菌数均多到无法计数或少到无法计数，则需继续稀释或减小稀释倍数。一般中等污秽水样取10^-1、10^-2与10^-3三个连续稀释度，污秽严重的取10^-1、10^-2与10^-3三个连续稀释度。

(2)接种；自最后三个稀释度的试管中各取1mL稀释水加入空的灭菌培养皿中，每一稀释度做两个培养皿。

(3)倒平板：各倾注15mL已熔化并冷却至45℃左右的牛肉膏朊胨培养基，立即放在桌上摇匀。

(4)培养：凝固后倒置于37℃培养箱中培养24h。

3．菌落计数方法

(1)先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个平板有较大片状菌苔生长，则不应采用，而应以无片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到平板的一半而其余的一半菌落分布又很均匀，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。

(2)首先选择平均菌落数在30~300之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数(表3—5例1)。

http://www.biaowu.com/UploadFile/2016627102439752.jpg

(3)若有两个稀释度的平均菌落数均在30~300之间，则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则取其中较小的菌落总数(表3—5例2及例3)。

(4)若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数(表3—5例4)。

(5)若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数(表3—5例5)。

(6)若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间，则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数(表3—5例6)。

两位以后的数字采取四舍五人的方法去掉。