1.(6分)DNA熔解温度(Tm)是使DNA双螺旋结构解开一半时所需要的温度，不同种类DNA的Tm值不同。如图表示DNA分子中G+C含量(占全部碱基的比例)与Tm的关系。下列有关叙述不正确的是 导学号14120361(　　)

A.—般地说，DNA分子的Tm与G+C含量呈正相关

B.Tm值相同的DNA分子中G+C的数量有可能不同

C.生物体内解旋酶也能使DNA双螺旋结构的氢键断裂而解开螺旋

D.DNA分子中G与C之间的氢键总数比A与T之间多

【解析】选D。DNA熔解温度(Tm)是使DNA双螺旋结构解开一半时所需要的温度，题图表示DNA分子中G+C含量(占全部碱基的比例)与Tm的关系，Tm越高，C+G含量越高，即DNA分子的Tm与C+G含量呈正相关，A正确；两DNA分子若Tm相同，则它们所含G+C比例相同，但C+G的数量不一定相同，B正确；解旋酶能使DNA双螺旋结构中的氢键断裂而解开螺旋，C正确；G-C碱基对之间有3个氢键，A-T碱基对之间有2个氢键，但整个DNA分子中G与C之间的氢键数量不一定比A与T之间多，D错误。

2.(6分)(2018·长沙模拟)如图表示采用同位素示踪技术和离心处理来探究DNA复制方式的过程图解，下列说法错误的是 (　　)

A.图中轻带表示¹⁴N-¹⁴N的DNA分子

B.本实验证明DNA的复制方式为半保留复制

C.细菌繁殖三代后取样、提取DNA，离心后离心管中出现三个条带

D.若将DNA双链分开来离心，则b、c两组实验结果都是得到两个条带

【解析】选C。图中轻带表示相对分子质量较小的DNA，即¹⁴N-¹⁴N的DNA分子，A正确；分析离心后的实验结果，繁殖一代后，DNA分子出现在中带位置，表明形成¹⁵N-¹⁴N的DNA分子，繁殖两代后，出现¹⁴N-¹⁴N和¹⁵N-¹⁴N的DNA分子，因此本实验可证明DNA的复制方式为半保留复制，B正确；一个细菌繁殖三代后产生1/4¹⁵N-¹⁴N的DNA分子和3/4¹⁴N-¹⁴N的DNA分子，所以试管中只能出现轻带和中带两个条带，C错误；若将DNA双链分开，b、c两组得到的都是¹⁴N脱氧核苷酸链和¹⁵N脱氧核苷酸链，离心后都得到两个条带，D正确。

【例题】三个基本反应步骤是模板DNA在体外加热至95 时解旋成单链，温度降至55 左右，引物与模板单链按碱基互补配对的原则结合，再调至72 左右时，DNA聚合酶沿5′→3′(磷酸到五碳糖)的方向延伸引物合成互补链。三个步骤完成一次称为一个循环。

资料二：图1显示了目的基因及其上限制酶切点，A、B、C、D是四种单链DNA片段；图2是质粒(显示限制酶切点和标记基因)，一般来说，为了使切割后的目的基因与运载体结合，往往使用两种限制酶，同时还要破坏载体上的一个标记基因。根据资料回答下列问题：

(1)若利用PCR技术增加目的基因的数量，所用的酶是____________。由图1可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取________作为引物，该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生DNA片段________个。

(2)为了提高目的基因和质粒的重组成功率，同时有利于受体细胞的筛选，应该选择的限制酶是______________。如果用限制酶Pst 、EcoR 和Hind 对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切割且每次机会相等，则形成的含有完整抗四环素基因的DNA片段有______种。

(3)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________________。

(4)对基因组文库的描述，不正确的是________。

A．含有某种生物的全部基因

B．基因中含有启动子和内含子

C．文库的基因是通过受体菌承载的

D．文库中的全部基因可以在物种间交流

答案　(1)Taq酶(或热稳定DNA聚合酶)　B和C　16  (2)Pst 和EcoR 　1　(3)农杆菌转化法　(4)D

解析　(1)利用PCR技术扩增目的基因时，所使用的酶是Taq酶。DNA复制需要引物，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，因此DNA合成总是从子链的5′端向3′端延伸，因此选用B、C单链DNA片段作为引物。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生DNA片段共2⁴＝16(个)。(2)为了提高目的基因和质粒的重组成功率，同时有利于受体细胞的筛选，一般选用双酶切法，且选用的限制酶不能破坏目的基因，若选用限制酶EcoR 和Hind ，则载体上的两个标记基因都会被破坏，因此应该选用的限制酶是Pst 和EcoR 。如果用限制酶Pst 、EcoR 和Hind 对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切割且每次机会相等，则只有Pst 和EcoR 切割后会形成含有完整抗四环素基因的DNA片段。(3)常采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。(4)基因组文库就是把某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌克隆子群体中；基因组文库含有某种生物的全部基因，基因中含有启动子和内含子，只有部分基因可以在物种间交流。