谷物籽粒粗淀粉测定法——中华人民共和国国家标准

Determination  of  crude  starch  in  cereals  seeds

UDC 633.1：543.8

GB 5006-85

    本标准适用于水稻、小麦、玉米、谷子、高梁等谷物籽粒中粗淀粉含量的测定。

1  测定原理

    淀粉是多糖聚合物，在一定酸性条件下，以氯化钙溶液为分散介质，淀粉可均匀分散在溶液中，并能形成稳定的具有旋光性的物质。而旋光度的大小与淀粉含量成正比，所以可用旋光法测定。

2  仪器、设备

  2.1  分析天平：感量0.001g。

2.2  实验用粉碎机。

2.3  电热恒温甘油浴锅：119±1℃，浴锅内放入工业甘油，液层厚度为2cm左右。

2.4  旋光仪：钠灯，灵敏度0.01度。

2.5  锥形瓶：150ml，250ml。

2.6  容量瓶：100ml。

2.7  滤纸直径：15～18cm，中速。

3  试剂配制

3.1．氯化钙－乙酸溶液：将氯化（ＣaＣＩ２·2Ｈ２Ｏ，分析纯）500g溶解于600 ml蒸馏水中，冷却后，过滤。其澄清液以波美比重计测定，在20℃条件下调溶液比重为1.3±0.02；用精密pH试纸检查,滴加冰乙酸（见GB 676－78《冰乙酸》，分析纯），粗调氯化钙溶液pH值为2.3左右，然后再用酸度计准确调pH值为2.3±0.05。

3.2  30％硫酸锌溶液（Ｗ/Ｖ）：取硫酸锌（ＺnSO4·7H2O，见GB 666－78《硫酸锌》，分析纯）30g，用蒸馏水溶解并稀释至100 ml 。

3.3  15％亚铁氰化钾溶液（Ｗ/Ｖ）：取亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6·3H2O  GB  1273-77《亚铁氰化钾》，分析纯）15g，用蒸馏水溶解并稀释至100 ml。

4  样品的选取和制备

  4.1  将样品挑选干净（带壳种子需脱壳），按四分法缩减取样约20 g。

  4.2  将选取的样品充分风干或在60～65℃的条件下约烘6h后粉碎，使95％的样品通过60目筛，混匀，装入磨口瓶备用。

5  测定步骤

5.1  称样：称取样品2.5g，准确至0.001g。按GB 3523－83《种子水分测定法》测定水分含量。

5.2  水解：将称好的样品放入250 ml锥形瓶中，在水解前5min左右，先加10 ml氯化钙－乙酸溶液湿润样品，充分摇匀，不留结块，必要时可加几粒玻璃珠，使其加速分散，并沿瓶壁加50 ml氯化钙－乙酸溶液，轻轻摇匀，避免颗粒粘附在液面以上的瓶壁上。加盖小漏斗，置于119±1℃甘油浴中，要求在5min内达到所需温度，此时瓶中溶液开始微沸，继续加热25min。取出放入冷水槽，冷却至室温。

注：通过实测得知氯化钙－乙酸溶液的沸点为118～120℃，当甘油浴的温度回升至119±1℃时，样品瓶中溶液开始微沸，因此也可根据瓶中液体沸腾程度，校准控温仪的温度。

5.3  提取：将水解液全部转入100 ml容量瓶中，用30 ml蒸馏水多次冲洗锥形瓶，洗液并入容量瓶中。加1 ml硫酸锌溶液，摇匀，再加1 ml亚铁氰化钾溶液，充分摇匀以沉淀蛋白质。若有泡沫，可加几滴无水乙醇消除。用蒸馏水定容，摇匀，过滤，弃去10～15ml初滤液，滤液供5.4测定。

5.4  测定：测定前，用空白液（氯化钙－乙酸液：蒸馏水＝6：4）调整旋光仪零点，再将滤液装满旋光管，在20±1℃下进行旋光测定，取两次读数平均值。

6  结果计算

6.1  计算公式

  粗淀粉（干基）的含量按下式计算。

              粗淀粉（％，）＝

式中：a――在旋光仪上读出的旋转角度；

      L――旋光管长度，g；

      W――样品重，g；

      203――淀粉比旋度；

      H――样品水分含量，％。

6.2  结果表示

  平行测定的数据用算术平均值表示，保留小数后两位。

6.3  允许相对误差

  谷物籽粒粗淀粉含量的两个平行测定结果的相对误差不得大于1.0％。

附 录 A

样品的脱脂与脱糖

（参考件）

Ａ.1  谷物种子内含可溶性糖和脂肪较少，经过多次洗糖与不洗糖、脱脂与不脱脂对比试验证明，其中有的谷物籽粒（小麦、水稻、高梁等）粗淀粉测定结果极相近，均在允许误差范围之内，故本标准不要求脱脂与脱糖处理。如遇有特殊样品（脂肪含量超过5％，可溶性糖含量超过4％）需要脱脂或脱糖时，可将称好的样品放入50ml离心管中，用乙醚脱脂，然后用60％热乙醇（以重量计）搅拌，离心，倾去上清液，重复洗至无糖反应为止。最后用60ml氯化钙－乙酸溶液将离心管内残留物全部转入250ml锥形瓶进行粗淀粉测定。

    附加说明：

    本标准由中华人民共和国农牧渔业部提出。

    本标准由黑龙江省农业科学院综合化验室起草。

    本标准主要起草人赵铁男、孟广勤。