AMPPD性质、机理及应用_yacoochem

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AMPPD性质、机理及应用

(2015-08-01 23:30:10)

标签：

化学发光试剂

amppd

检测试剂

分类：检测试剂

3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷（AMPPD），CAS号122341-56-4，分子式C18H23O7P，AMPPD为1，2-二氧环已烷衍生物，它是一种生物化学领域中超灵敏的碱性磷酸酶底物，其特点：反应速度快，在很短时间内提供正确可靠的结果。在它的分子结构中有两个重要部分，一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环，它可以断裂并发射光子；另一个是磷酸根基团，它维持着整个分子结构的稳定。在通常情况下，这种化合物很稳定。但是，如果有碱性磷酸酶存在，磷酸二氧杂环丁烷作为酶的底物会在酶的催化一脱去磷酸根基团，形成一个不稳定的中间体。这个中间体随即自行分解（二氧四节环断裂）。

AMPPD是碱性磷酸酶的化学发光底物，在适宜的缓冲溶液中，随着酶的催化水解作用，AMPPD分解成AMP-D，后者发出强度很高的光信号，其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时，便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。目前已广泛用作化学发光免疫分析的发光底物，具有很高的检测灵敏度、适用于检测各种分子量的物质、稳定的发光底物、检测结果稳定、重复性好、检测线性范围宽、不需要特殊的发光底物-抗原/抗体连接物、方便，容易使用、可应用多种分析模式（夹心、竞争、抗体检测等）等优点，已在医学上推广使用。但由于其价格较高，限制了其大规模的发展使用。价格高的主要原因是该物质制备较为困难，合成工艺复杂。

AMPPD 在碱性条件下，被AP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子，其有2～30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光，在15min时其强度达到高峰，15～60min内光强度保持相对稳定。该试剂采用微粒子化学发光技术，采用最新磁性微粒，用以包被抗体。用碱性磷酸酶（ALP）标记抗原（抗体）。经过普通抗原抗体反应，碱性磷酸酶结合在微粒子上，碱性磷酸酶的结合量同病人血清中的待测物质成比例。经过洗涤（反应管两边有磁场，磁性微粒包被的抗原抗体结合物被吸附在管子两边，其余游离部分被抽吸掉），最后加入发光底物DioxetanePhosphate，5分钟后，仪器通过光电倍增管检测反应的发光强度。

目前我国市场上AMPPD很大一部分被国外品牌占据，国内有关于ANPPD的专利，但市场占据缺乏高质量产品。苏州亚科化学合成AMPPD具有自己的工艺路线，并打出自己的品牌Yacoo，在AMPPD市场上占据一定的份额。