体外重组蛋白表达技术发展已比较迅速，体外蛋白表达系统主要包括两大类：原核表达系统和真核表达系统，原核蛋白表达系统主要利用大肠杆菌蛋白表达系统，而真核表达系统包括哺乳动物细胞表达和酵母蛋白表达。其中操作最复杂要求最高投入最多的当属哺乳动物细胞蛋白表达了，而细胞培养是第一步，虽然步骤非核心但是却十分重要，本文主要介绍了细胞培养细胞房的清洁管理。

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更多蛋白表达实验原理/操作/FAQ请见：http://www.detaibio.com/topics/dan-bai-biao-da.htl

一、细胞房常规使用管理

1、 每天使用细胞房前必须提前将层流室及缓冲间紫外灯打开照射30min。

2、 灭菌消毒结束，通风15min，方可进入细胞房工作。

3、 进入细胞房前先换专用鞋。

4、 进入缓冲间穿换上专用实验服。

5、 进入层流室须戴上手套、口罩，消毒后才可以进行实验。

6、 每间层流室内最多可4个人使用，除实验外，避免长时间逗留。

7、 实验操作时尽量避免交谈，走动。

8、 始终保持细胞房内外地面、桌面的清洁，物品摆放整齐。

9、 每天工作结束后，需关掉细胞房内不用的仪器、细胞房的灯、空调，离开时锁好细胞房的门。

10、细胞房内的实验服、鞋帽禁止穿出实验室。

11、细胞房内垃圾及时清理，每周五对细胞房进行消毒清洁（参见细胞房消毒）。

二、培养箱使用

1、从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。

2、培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。

3、按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。

4、普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次。

5、每次从培养箱拿取物品时，注意培养箱的CO2补给情况，及CO2钢瓶中气体使用情况。

三、超净台使用

1、超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒。

2、点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。

3、超净台中应摆放废液杯和废品杯各一只，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内垃圾倒入水池或垃圾桶中，并冲洗晾干备用。

四、显微镜使用

1、显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。

2、离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。

细胞房消毒清洁

一、 细胞房常用消毒剂

1、清洁用水：纯净水

2、消毒剂：75%乙醇

           0.2% 84消毒液：5L纯净水+10mL84消毒液

      0.2% 新洁尔灭：5L纯净水+10mL新洁尔灭

二、细胞房清洁频次

1、每周五进行一次清洁、消毒；消毒液要交换使用，每种消毒液使用一个月要更换另一种，防止微生物的耐药性。

2、如有大物体搬进洁净区，需要对物体以及物体接触过的地方进行及时清洁、消毒

三、清洁、消毒程序

1、提前配制2组消毒液，几块50cm长的一次性医用纱布

2、将待清洁区域内废弃物清理倒掉

3、用一组消毒液+纯净水对门窗、玻璃、墙面、天花板、照明灯（两次清洁）

4、用另一组消毒液+纯净水依次对细胞室设备、桌面、地面（两次清洁）

5、清洁用具及时进行清洁，并存放到相应位置，不得随意乱放

6、紫外照射过夜

四、注意事项

1、清洁时不能干扫或干擦，以免起尘，造成污染

2、灯具清洁后要停数分钟后启用电源开关

3、清洁标准为目检洁净，无废物，无印记，无污渍。

哺乳动物细胞培养及相关实验操作请见：

http://www.detaibio.com/topics/bu-ru-dong-wu-xi-bao-biao-da.html