产品介绍:
Hoechst 33342是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33342常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
Hoechst染料是一类在显微观察中标记DNA的荧光染料。因为这类荧光染料能标记DNA,所以它们也经常用于细胞核和线粒体的显像观察。这类染料中两个相关的染料Hoechst
33258和Hoechst
33342经常使用。这两种染料都在紫外光下350nm处被激发,都在461nm处最大发射光附近发射蓝/青色荧光。Hoechst染料可以用于活细胞或者固定化细胞,并且经常用来代替其它核酸染料如DAPI。
这两种染料关键的不同点在于,与DAPI相比,Hoechst
33342加有乙基,这使它具有更强的亲脂性,因此能更好的透过完整的细胞膜。在一些实验中,Hoechst
33258的渗透性明显比Hoechst
33342要弱些。这些染料也可以用来检测样品中的DNA含量,通过绘制发射光强度与DNA含量的标准曲线。
技术资料:
1.Ex(nm):350
2.Em(nm):461
3.分子量:561.93
4.溶剂:DMSO
5.分子式:C27H28N6O
· 3HCl
6.外观:黄绿色粉末
染色程序:
(1) 用PBS或合适的缓冲液制备10~50µM Hoechst33342染料。
(2) 将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加入细胞培养物中(可以用1/10浓度的Hoechst染料缓冲液代替培养基)。
(3) 在37℃培养细胞10~20分钟。
(4) 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
(5) 用带有350nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
注意事项:
(1) Hoechst
33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
(2) 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
(3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
(4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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