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FITC标记羧甲基葡聚糖

(2020-05-28 09:42:27)
标签:

fitc标记羧甲基葡聚糖

分类: 生命科学/生化试剂
TdB葡聚糖衍生物
FITC标记羧甲基葡聚糖
Chemical names: FITC-羧甲基-葡聚糖;Fluorescein- thiocarbamoyl-(O-carboxymethyl)-dextran
Trade name: FITC-CM-dextran
FITC标记羧甲基葡聚糖是带有羧甲基取代基的FITC标记葡聚糖。为了研究细胞和细胞膜,开发了FITC标记羧甲基葡聚糖。羧甲基基团使产品带有负电荷。检查每个批次的分子量,取代度,干燥失重和游离FITC。TdB生产分子量范围从4KDa到150KDa的 FITC标记羧甲基葡聚糖。 FITC标记羧甲基葡聚糖呈橙黄色粉末。
结构与性质
FITC标记羧甲基葡聚糖是由选定的葡聚糖组分与活化的羧甲基衍生物在碱性条件反应制备,O-羧甲基基团也因此被接到糖链上。羧甲基的含量大约是5%,相当于每5个葡萄糖单元上接1个羧甲基基团。然后,通过和荧光素异硫氰酸酯反应,接入荧光素(FITC)基团。FITC的取代度在0.003–0.008之间。FITC标记羧甲基葡聚糖呈橙黄色粉末,极易溶于水或电解质溶液。由于具有负电荷的羧基基团,该产品具有明显的聚阴离子性能。FITC标记羧甲基葡聚糖的溶液性质与羧甲基葡聚糖性质相当(1-3)。在中性溶液中,羧甲基取代基相互排斥,导致葡聚糖链膨胀。FITC-CM葡聚糖不溶于大多数有机溶剂,例如乙醇、甲醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯。
图 1. FITC标记羧甲基葡聚糖的结构式
图 1. FITC标记羧甲基葡聚糖的结构式
赖氨酸葡聚糖 (or Dextran-lysine-fixable) 是由来自肠系膜白串珠菌的葡聚糖的特定片段通过赖氨酸标记而合成的。然后用FITC在温和条件下功能化得到FITC标记赖氨酸葡聚糖。经纯化,控制产品的分子量,外观,溶解度,取代度,pH,游离赖氨酸和游离FITC。产品的分子量是由对应的葡聚糖片段的相近分子量来确定的。例如,FITC标记赖氨酸葡聚糖4的分子量大约为4000 Da。实际分子量是通过GPC测定的。葡聚糖来源于肠系膜白串珠菌B-512F,由α-D-(1-6)线性葡聚糖组成, α-(1-3) 侧链含量较低(2-5%)。葡聚糖的分子量范围从4000 到500000,并且通过GPC,比旋,吸光率和其它参数严格控制质量。
图2 FITC标记羧甲基葡聚糖在0.025M硼酸盐缓冲溶液(10mg溶于50 ml缓冲液pH9.0)的荧光图谱。激发波长493nm;发射波长519nm
图2. FITC标记羧甲基葡聚糖在0.025M硼酸盐缓冲溶液(10mg溶于50 ml缓冲液pH9.0)的荧光图谱。
激发波长493nm;发射波长519nm
储存和稳定性
已开展的稳定性预期研究证实,羧甲基葡聚糖至少在3年内保持其效力和纯度(未发表的研究)。根据我们对FITC标记葡聚糖的经验,推测FITC标记羧甲基葡聚糖具有类似的稳定性。建议将FITC标记羧甲基葡聚糖储存在密闭容器中,在室温下避光保存,可保存6年。
应用
FITC标记羧甲基葡聚糖主要用于渗透性和微循环研究。羧基赋予分子一个负电荷,这或有助于获取细胞膜和组织渗透特性信息。游离羧基也可用于将其他物质与葡聚糖链偶联。
羧甲基葡聚糖被发现具有生物相容性,用作一些药物和诊断应用的起始原料。FITC标记羧甲基葡聚糖的毒性预期很低。在葡聚糖链中接入羧基,为将具备有趣生物活性的分子(药物、酶、诊断示踪剂)固定在葡聚糖上提供了进一步机会。羧基部分可用于许多反应,例如酯化、和胺发生酰胺化、UGI反应或Passerini反应。简单的离子结合反应也可以提供一系列包含不同阳离子分子(4,5)的衍生物。羧基还将赋予分子整体负电荷,这可能有助于获得有关细胞膜和组织的渗透特性的信息(6)。FITC标记羧甲基葡聚糖在药物传递系统研究中的应用也见诸报道(7)。
产品列表
产品编号
品名
分子量(kDa)
包装
FITC-CM-dextran 4
4
100 mg
1 g
FITC-CM-dextran 20
20
100 mg
1 g
FITC-CM-dextran 40
40
100 mg
1 g
FITC-CM-dextran 70
70
100 mg
1 g
FITC-CM-dextran 150
150
100 mg
1 g
参考文献
1. K. Gekko, Solution properties of dextran and its ionic derivatives, ACS Symposium Series, 150(1981), 415-438.
2. K. Gekko and H. Noguchi, Selective interaction of calcium and magnesium ions with ionic dextran derivatives, Carbohydr Res, 69(1979), 323-326.
3. O.Smidsröd and A.Haug, Estimation of the relative stiffness of the molecular chain in polyelectrolytes from measurements of viscosity at different ionic strengths, Biopolymers, 10(1971), 1213-27.
4. P. Rongved and J. Klaveness, Water soluble polysaccharides as carriers of paramagnetic contrast reagents for magnetic resonance imaging; Synthesis and relaxation properties, Carbohydr Res, 214(1991), 315-323.
5. S.W Zheng, M. Huang et al., RGD-conjugated iron oxide magnetic nanoparticles for magnetic resonance imaging contrast enhancement and hyperthermia, magnetic resonance imaging contrast enhancement and hyperthermia, J Biomater Appl, 28(2014), 1051-1059.
6. D. Asgiersson, D. Venturoli, B. Rippe and C. Rippe, Increased glomerular permeability to negatively charged polysucrose relative to neutral polysucrose in rats, Am J Physiol Renal Physiol, 291(2006), F1083-9.
7. C. Martin, E .Dolmazon, K. Moylan et al., A charge neutral tuneable polymersome capable of high biological encapsulation efficiency and cell permeation, Int J Pharmaceutics, 481(2015), 1-8.
西宝生物专业提供TdB葡聚糖及其衍生物、荧光标记多糖等产品,欢迎来电400-021-8158垂询!
 

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