一、分离出来的淋巴细胞用于细胞培养

 1、取动物脾脏组织时，应注意取材的无菌操作。分离出脾脏组织。

 2、将脾脏转入PBS或者培养基中，注意去除脾脏周围的其他组织，不要剪破血管。

 3、研磨脾脏，方法有二：在200目金属筛网上，用注射器内芯研磨；或者用两玻璃片夹着脾脏直接研磨，然后在把含有细胞的液体过筛网。

 4、2000r/min离心3min获得细胞此，此时有各种免疫细胞和红细胞，脾脏自身细胞很少，因为研磨时很难释   放，可以忽略不计，根据你的具体实验，可以洗几次。

 5、如果红细胞影响实验，可以用红细胞裂解液裂解。加红细胞裂解液8mL，混匀脾细胞，静置5-6min，待红细胞完全破碎，，弃上清去除红细胞，Hank’s液洗1-2遍，然后即可行细胞培养。

二、分离出细胞用于提取RNA

 按上述步骤进行至5后，加TRIZOL    1ml保存至冰箱。日后提取RNA

 滤孔直径与滤网目数的对应关系
 滤孔直径（mm）        目数（目）
          0.771                   20
          0.420                   40

          0.180                   80
          0.152                  100
          0.125                  120
          0.105                  150
          0.089                 180
          0.074                 200
          0.053                 270
0.044         325