细胞添加剂的常见类型与常见问题及使用注意事项！

 

百欧博伟生物：细胞添加剂是指在细胞培养过程中添加到基础培养基中的各种成分，用于优化细胞生长、维持细胞功能或实现特定实验目的。这些添加剂根据细胞类型和实验需求的不同而有所差异，常见类型包括以下分类：

 

一、常见细胞添加剂类型

 

1、血清（如胎牛血清FBS）

 

作用：提供生长因子、激素、营养物质（氨基酸、维生素）和载体蛋白（如白蛋白）。

 

注意：可能引入批次差异或病原体风险，部分实验需使用无血清培养基。

 

2、生长因子与细胞因子

 

例：EGF（表皮生长因子）、FGF（成纤维细胞生长因子）、胰岛素、VEGF（血管内皮生长因子）。

 

用途：促进特定细胞增殖或分化（如干细胞培养、组织工程）。

 

3、抗生素与抗真菌剂

 

例：青霉素-链霉素（Pen-Strep）、两性霉素B。

 

用途：预防细菌或真菌污染，但长期使用可能影响细胞代谢。

 

4、缓冲系统

 

例：HEPES缓冲液、碳酸氢钠（NaHCO）。

 

用途：维持培养基pH稳定（尤其在开放式培养条件中）。

 

5、代谢补充剂

 

例：谷氨酰胺（Glutamine）、非必需氨基酸（NEAA）。

 

用途：提供能量或合成代谢所需底物。

 

6、选择标记

 

例：嘌呤霉素（Puromycin）、G418（遗传霉素）。

 

用途：筛选转染成功的细胞（需配合抗性基因使用）。

 

7、其他功能添加剂

 

贴壁因子：胶原蛋白、纤连蛋白（促进细胞贴壁）。

 

抗氧化剂：β-巯基乙醇（用于干细胞培养）。

 

分化诱导剂：视黄酸（RA）、BMP（骨形态发生蛋白）。

 

二、选择添加剂的注意事项

 

1、细胞类型特异性：原代细胞、肿瘤细胞或干细胞对添加剂需求差异大。

 

2、实验目的：

 

增殖实验：需高浓度生长因子。

 

分化实验：需特定诱导剂（如神经干细胞分化为神经元）。

 

药物筛选：需减少血清干扰，采用无血清培养基。

 

3、安全性：避免添加剂与实验试剂冲突（如抗生素可能干扰某些药物测试）。

 

4、成本控制：血清和重组生长因子价格较高，可考虑替代方案（如血清替代物）。

 

三、新兴趋势

 

1、无血清/化学成分明确培养基：减少批次差异，提高实验可重复性。

 

2、3D培养添加剂：基质胶、水凝胶，用于类器官或三维培养。

 

3、基因编辑辅助添加剂：如实验中使用的Alt-R S.p. HiFi Cas9缓冲液。

 

四、常见问题

 

Q：是否需要过滤除菌？

 

A：液体添加剂（如谷氨酰胺）需过滤或购买无菌产品，冻干粉需溶解后过滤。

 

Q：添加剂保存方法？

 

A：生长因子需-20保存，谷氨酰胺（液体）需4避光，避免反复冻融。

 

Q：如何避免细胞污染？

 

A：严格无菌操作，必要时添加双抗，但污染后需丢弃培养物。

 

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